Bmi-1基因沉默对鼻咽癌细胞CNE2生物学行为的影响
王巧1
罗清2
李亚军3
邹彦2
1.贵州省人民医院,贵阳550002;遵义医学院附属肿瘤医院2.遵义医学院附属肿瘤医院3.遵义医学院附属肿瘤医院;遵义医学院第三附属医院
摘要：目的 探讨慢病毒靶向沉默Bmi-1基因对鼻咽癌细胞CNE2生物学行为的影响.方法 设计3条Bmi-1shRNA干扰系列,构建慢病毒重组载体PLVx-shRNA2-Bmi-1,用重组载体转染293T细胞,收集上层病毒液浓缩、滴定.将CNE2细胞随机分为5组,对照组不进行感染,shRNA1、2、3组分别感染表达shRNA1、2、3的慢病毒,空载体组感染空载的慢病毒.感染48 h,用RT-PCR及Western blotting法分别检测Bmi-1基因及蛋白的相对表达量,筛选沉默Bmi-1效率最佳的干扰序列.用平板克隆形成实验检测Bmi-1基因沉默后CNE2细胞增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡率和周期分布.结果 插入的序列与设计的3条shRNA序列碱基排列一致,说明目的片段均已正确插入,PLVx-shRNA2-Bmi-1慢病毒表达载体构建成功.与其他两组比较,Bmi-1-shRNA1、2、3组Bmi-1 mRNA及蛋白相对表达量低(P均＜0.05),Bmi-1-shRNA3组最低(P均＜0.05),沉默效率最佳.与空载体组比较,Bmi-1-shR-NA3组增殖能力弱(P均＜0.05),细胞凋亡率高(P均＜0.05),Bmi-1-shRNA3组G1期细胞比例高、S期细胞比例低(P均＜0.05).结论 沉默Bmi-1基因可抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖、促进其凋亡,并改变细胞周期.
关键词：鼻咽癌Bmi-1基因CNE2细胞细胞增殖细胞凋亡细胞周期
分类号：R739.6(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81560444)贵州省遵义市汇川区科技局课题(20120724)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1-4 )
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