miR-196a对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、成瘤能力的影响及其机制
任明亮
李辉
刘冬斌
陈国雄
谭镇南
刘鹄
1.南方医科大学附属南海医院,广东佛山,5282002.南方医科大学附属南海医院,广东佛山,5282003.南方医科大学附属南海医院,广东佛山,5282004.南方医科大学附属南海医院,广东佛山,5282005.南方医科大学附属南海医院,广东佛山,5282006.南方医科大学附属南海医院,广东佛山,528200
摘要:目的 探讨miR-196a对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和成瘤能力的影响及可能的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测人骨肉瘤细胞系MG-63及人成骨细胞hFOB1.19中miR-196a相对表达量,结果其miR-196a相对表达量分别为8.70 ±0.42、1.01 ±0.05,二者比较P<0.05.取对数生长期的MG-63细胞,随机分为miR-196a inhibitor组和inhibitor-NC组,分别转染miR-196a inhibitor和inhibitor-NC.转染24 h采用实时荧光定量PCR法检测两组miR-196a相对表达量,转染24、48、72、96 h采用CCK-8法检测两组细胞增殖能力,转染48 h采用流式细胞术检测两组细胞凋亡能力.取12只裸鼠分别采用转染miR-196a inhibitor和inhibitor-NC的细胞悬液行右下肢皮下成瘤实验(各6只).每5天测量移植瘤体积,20天后处死裸鼠称取移植瘤质量.采用实时荧光定量 PCR法和Western blotting法检测两组叉头框蛋白1(FOXO1)mRNA及蛋白表达.结果 miR-196a inhibitor组、inhibitor-NC组miR-196a相对表达量分别为0.31 ±0.08、1.03 ±0.03,细胞凋亡率分别为(23.50 ±2.11)%、(3.44 ±0.39)%,移植瘤质量分别为(0.50 ±0.09)、(1.20 ±0.14)g,两组比较P均<0.05.两组转染24 h细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05),miR-196a inhibitor 组转染48、72、96 h细胞增殖能力均低于 inhibitor-NC 组(P <0.05或 <0.01).miR-196a inhibitor组各时间点移植瘤体积均小于 inhibitor-NC 组(P 均 <0.01).miR-196a ihhibitor 组FOXO1 mRNA和蛋白相对表达量均高于inhibitor-NC组(P均<0.05).结论 miR-196a在骨肉瘤细胞中表达升高,下调miR-196a表达能够明显抑制骨肉瘤细胞的增殖及成瘤能力,并促进其凋亡,其机制可能与靶向调控FOXO1基因表达有关.
关键词:骨肉瘤微小RNA-196a叉头框蛋白1细胞增殖细胞凋亡
分类号:R738.3(运动系肿瘤)
资助基金:广东省医学科学技术研究基金资助项目(B2017050)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 37-40 )
