TET1过表达载体构建及其稳定过表达的宫颈癌HeLa细胞鉴定
沈艳1
沈凤1
闫海洋1
徐殿琴1
丁妍2
谭玉洁3
1.贵州医科大学,贵阳,5500002.湖北医药学院附属太和医院3.贵州医科大学,贵阳550000;贵州医科大学附属医院
摘要：目的 构建甲基胞嘧啶双加氧酶1(TET1)过表达载体并对其稳定过表达的宫颈癌HeLa细胞进行鉴定.方法 从人宫颈癌组织中扩增出 TET1目的片段并将其克隆到 pLVX-MYRF 载体上,构建真核表达载体pLVX-MYRF-TET1,进行双酶切及测序验证.选择宫颈癌HeLa细胞,随机分为TET1组、阴性对照组,采用脂质体转染法分别转染重组质粒pLVX-MYRF-TET1、空质粒pLVX-MYRF,采用Real-time PCR法和Western blotting法检测两组TET1 mRNA和蛋白表达.结果 经双酶切分析及测序验证,成功构建了真核表达载体pLVX-MYRF-TET1.与阴性对照组比较,TET1组TET1 mRNA和蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05).结论 成功构建TET1过表达载体pLVX-MYRF-TET1,并且能在宫颈癌HeLa细胞中稳定过表达.
关键词：宫颈癌Hela细胞甲基胞嘧啶双加氧酶1载体构建脂质体转染
分类号：R373.33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81602297)贵州省科技计划(2016-1121)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 43-45 )