转染miR-181 a模拟物和抑制物的宫颈癌细胞迁移、增殖、凋亡情况观察

黎玉涵; 孙小丽; 何少仪; 胡桂英; 洪小山; 布俏雯; 罗喜平

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2018.19.004

摘要：目的观察转染微小RNA181 a(miR-181 a)模拟物、抑制物的宫颈癌SiHa和HeLa细胞增殖、凋亡、迁移情况的变化,探讨miR-181 a在宫颈癌细胞中发挥的作用.方法将体外培养的SiHa、HeLa细胞分为观察1组、对照1组和空白1组.观察1组转染miR-181 a模拟物、对照组1组转染无关序列、空白组只加入转染试剂.将体外培养的SiHa、HeLa细胞分为观察2组、对照2组和空白2组.观察2组转染miR-181a抑制物、对照组2组转染无关序列、空白组只加入转染试剂.①继续培养24 h后采用实时荧光定量PCR法检测各组miR-181a;②继续培养12 h后采用Transwell小室实验检测各组穿膜细胞数;继续培养48 h后采用克隆形成实验测算各组克隆形成率;④用流式细胞术测算各组细胞凋亡率.结果 ①观察1组、对照1组、空白1组SiHa细胞miR-181a相对表达量分别为2.4±0.08、1.09±0.04、0.85±0.02,Transwell小室实验穿膜细胞数分别为40.60±2.84、58.40±3.56、63.20±2.53,克隆形成实验克隆形成率分别为20.54％±3.40％、50.99％±1.78％、53.06％±4.91％,细胞凋亡率分别为47.86％±2.04％、36.74％±3.50％、32.15％±2.30％.观察1组SiHa细胞miR-181a相对表达量、Transwell小室实验穿膜细胞数、克隆形成实验克隆形成率、细胞凋亡率与对照1组、空白1组相比,P均<0.05.观察1组HeLa细胞miR-181 a相对表达量、Transwell小室实验穿膜细胞数、克隆形成实验克隆形成率、细胞凋亡率与对照1组、空白1组相比,P均<0.05.②观察2组、对照2组、空白2组SiHa细胞miR-181a相对表达量分别为0.09±0.00、0.93±0.02、0.89±0.01,Transwell小室实验穿膜细胞数分别为113.80±4.50、67.20±2.10、65.20±2.03,克隆形成实验克隆形成率分别为69.23％±4.25％、52.71％±1.84％、51.67％±2.25％,细胞凋亡率分别为30.15％±2.51％、32.51％±2.10％、33.05％±2.14％.观察2组SiHa细胞miR-181a相对表达量、Transwell小室实验穿膜细胞数、克隆形成实验克隆形成率、细胞凋亡率与对照2组、空白2组相比,P均<0.05.③观察1组、对照1组、空白1组HeLa细胞miR-181a相对表达量分别为2.31±0.08、0.91±0.02、0.99±0.06,Transwell小室实验穿膜细胞数分别为40.00±3.51、56.40±3.56、58.80±2.13,克隆形成实验克隆形成率分别为36.65％±1.82％、54.77％±3.52％、58.29％±2.56％,细胞凋亡率分别为46.66％±2.80％、23.64％±3.09％、22.10％±4.07％.④观察2组、对照2组、空白2组HeLa细胞miR-181a相对表达量分别为0.02±0.00、0.80±0.02、0.93±0.05,Transwell小室实验穿膜细胞数分别为77.60±3.54、57.20±6.20、56.40±2.23,克隆形成实验克隆形成率分别为79.11％±2.70％、56.82％±1.98％、57.34％±2.12％,细胞凋亡率分别为17.67％±2.30％、20.70％±2.09％、21.30％±3.17％.观察2组HeLa细胞miR-181a相对表达量、Transwell小室实验穿膜细胞数、克隆形成实验克隆形成率、细胞凋亡率与对照2组、空白2组相比,P均<0.05.结论转染miR-181a模拟物的宫颈癌SiHa和HeLa细胞迁移和增殖能力下降,细胞凋亡率升高.转染miR-181a抑制物可以达到相反的效果.