胃癌组织中胃癌相关成纤维细胞、胃正常成纤维细胞的分离鉴定及增殖情况观察
封兰兰
孙伟
朱吉海
刘珺
赵珺
刘燕
1.青海大学医学院,西宁,8100162.青海大学医学院,西宁,8100163.青海大学医学院,西宁,8100164.青海大学医学院,西宁,8100165.青海大学医学院,西宁,8100166.青海大学医学院,西宁,810016
摘要：目的 从胃癌组织中分离胃癌相关成纤维细胞(CAFs)及胃正常成纤维细胞(NFs),并鉴定其功能.方法 3例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织.采用组织贴壁块法及胶原酶消化法分离胃癌组织中的胃CAFs及胃正常黏膜组织中的胃NFs.原代培养胃CAFs、胃NFs,差速贴壁传代法分离并纯化细胞,差速贴壁20 min.倒置显微镜下观察胃CAFs、胃NFs细胞形态,采用免疫细胞化学染色法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白18(CK18)、波形蛋白(Vimentin).取3个来源分离的胃CAFs、胃NFs,分别于细胞贴壁24 h、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d采用MTT法测算细胞光密度(OD)值,绘制细胞生长曲线.结果 胃癌CAFs细胞大小不一,呈梭形或星形,排列不规则并呈重叠生长;胃NFs细胞均匀一致,呈长梭形,排列规则.胃CAFs细胞存在α-SMA、Vimentin阳性表达,CK18阴性表达,胃NFs细胞存在Vimentin阳性表达,α-SMA、CK18阴性表达.培养3～6天,各来源胃CAFs细胞OD值均高于胃NFs(P均<0.05).结论 成功分离胃CAFs、胃NFs.胃CAFs、胃NFs均存在Vimentin表达.胃CAFs增殖能力优于胃NFs.
关键词：胃癌癌相关成纤维细胞正常成纤维细胞细胞角蛋白18波形蛋白α-平滑肌肌动蛋白细胞增殖
分类号：R36(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(81550043)国家自然科学基金(81460428)青海省自然科学基金(2015-ZJ-940Q)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 5-8 )
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