膝骨关节炎患者软骨组织、软骨细胞中let-7a表达变化及意义
陈林建
李朝晖
罗真
1.广东医科大学附属佛山禅城中心医院,广东佛山,5280312.广东医科大学附属佛山禅城中心医院,广东佛山,5280313.广东医科大学附属佛山禅城中心医院,广东佛山,528031
摘要:目的 观察let-7a在膝骨关节炎(KOA)患者软骨组织、软骨细胞中的表达变化,并探讨其对细胞凋亡和自噬的影响.方法 ①收集40例KOA患者及15例行下肢截肢手术患者的膝关节软骨组织并分离培养软骨细胞.采用实时荧光定量PCR法分别检测KOA软骨组织、正常软骨组织及KOA软骨细胞、正常软骨细胞let-7a mR-NA相对表达量.②取生长状态良好的KOA软骨细胞,随机分为let-7a过表达组和对照组,分别转染let-7a mimics及NC-mimics,转染48 h采用实时荧光定量PCR法检测let-7a mRNA相对表达量,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3,包括LC3Ⅱ、LC3Ⅰ)、Beclin1表达,计算Bcl-2/Bax、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ.结果 ①KOA软骨组织及正常软骨组织let-7a mRNA相对表达量分别为0.48±0.18、0.29±0.13,两者相比P均<0.01;KOA软骨细胞、正常软骨细胞let-7a mRNA相对表达量分别为1.02±0.07、0.98±0.05,两者相比P<0.01.②let-7a过表达组let-7a mRNA相对表达量高于对照组,细胞凋亡率低于对照组(P均<0.01);Bcl-2、LC3Ⅱ、Beclin1蛋白相对表达量及Bcl-2/Bax、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均高于对照组,Bax、LC3Ⅰ蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05).结论 let-7a在KOA患者软骨组织、软骨细胞中的表达均降低;上调let-7a表达能够促进软骨细胞自噬并抑制其凋亡,从而发挥软骨保护作用.
关键词:let-7a骨性关节炎膝关节软骨组织软骨细胞细胞凋亡细胞自噬
分类号:R684.3(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
资助基金:佛山市卫生和计划生育局医学科研项目(20160148)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 9-12 )
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山东医药

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ISSN:1002-266X
年,卷(期):2018,58(32)
所属栏目:论著