CRP基因沉默后心肌细胞系H9c2的miR-21及其靶基因表达、细胞活力观察
程玲慧1
余丽霞2
叶凤英1
权磊1
谭文3
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广州,5100062.华南理工大学医学院3.广东工业大学生物医药研究院
摘要：目的 观察沉默炎症因子CRP基因对H9c2心肌细胞活力的影响,并探讨其机制.方法 ①取H9c2心肌细胞,随机分为CRP沉默组和对照组.CRP沉默组转染对CRP特异性沉默的pLV-shRNA-CRP慢病毒,对照组转染无敲减作用的pLV-shRNA-Scramble慢病毒.筛选与鉴定慢病毒载体成功转染H9c2心肌细胞.转染48 h后,采用实时定量PCR法观察两组H-19c2心肌细胞CRP基因的沉默效率、miR-21及PDCD4、PTEN、Spry1 mRNA.②取H9c2心肌细胞,随机分为空白组、对照组和CRP沉默组,空白组不转染病毒加入等量的DMEM培养基,对照组转染pLV-shRNA-Scramble慢病毒颗粒,CRP沉默组转染pLV-shRNA-CRP慢病毒颗粒.转染24h后,采用MTT法检测三组H9c2心肌细胞活力.结果 ①CRP沉默组和对照组H9c2心肌细胞中CRP mRNA相对表达量分别为0.320±0.069、1±0.090,miR-21相对表达量分别为0.740±0.099、0.280±0.010,两组相比P均＜0.01.CRP沉默组PDCD4、PTEN和Spry1 mRNA表达均低于对照组(P均＜0.01).②CRP沉默组、对照组和空白组细胞活力分别为0.78±0.030、0.66 +0.010、1.00±0.013;与空白组相比,CRP沉默组和对照组细胞活力均下降(P均＜0.01);与对照组相比,CRP沉默组细胞活力上升(P＜0.05).结论 沉默CRP基因可促进H9c2心肌细胞存活,这可能与其可增加H9c2心肌细胞中miR-21表达,抑制PDCD4、PTEN和Spry1的基因表达有关.
关键词：缺血性心脏病心肌细胞微小RNA-21PDCD4基因PTEN基因Spry1基因基因沉默C反应蛋白
分类号：R541(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：广东省自然科学基金(22016A030313467)广东省社会发展领域新药创制重大项目(2014B020210001)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
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