钙调神经磷酸酶Aβ基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞内向整流钾电流和动作电位的变化
扶泽南
杨龙
夏桂玲
何炯红
黄勇淇
田野
1.贵州省人民医院·贵州医科大学附属人民医院,贵阳5500022.贵州省人民医院·贵州医科大学附属人民医院,贵阳5500023.贵州省人民医院·贵州医科大学附属人民医院,贵阳5500024.贵州省人民医院·贵州医科大学附属人民医院,贵阳5500025.贵州省人民医院·贵州医科大学附属人民医院,贵阳5500026.贵州省人民医院·贵州医科大学附属人民医院,贵阳550002
摘要：目的 观察钙调神经磷酸酶Aβ亚基(CnAβ)基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞内向整流钾电流(Ik1)和动作电位的变化.方法 1天龄SD乳鼠,分离心室肌细胞,培养48h后换为无血清培养基,将细胞分为A、B、C、D组.A组加入MOI=50的腺病毒空载体,感染6 h时更换成2倍体积新鲜无血清DMEM,培养48 h.B组加入MOI=50的腺病毒空载体,感染6 h换为2倍体积新鲜无血清DMEM,感染24 h时加入终浓度为100μmol/L的PE,培养48 h.C组加入MOI=50的A1,感染6 h时换成2倍体积新鲜无血清DMEM,感染24 h时加入终浓度为100μmol/L的PE,培养48 h.D组加入MOI=50的重组腺病毒shRNA干扰载体介导沉默编码CnAβ的基因(Ad-CnAβshRNA1,A1),感染6 h时换成2倍体积新鲜无血清DMEM,培养48 h.采用Western blotting法检测各组心室肌细胞CnAβ蛋白,采用全细胞膜片钳实验检测Ik1,观察并记录动作电位复极20％、50％和90％(APD20、APD50、APD90)时的动作电位.结果 A、B、C、D组心室肌细胞CnAβ蛋白相对表达量分别为1.0±0.01、2.59±0.30、1.00±0.16、0.82±0.16;B组与A组比较,P<0.05;C组与B组比较,P<0.05.与A组比较,B组-140 mV～-90 mV时心室肌细胞Ik1电流密度降低(P均<0.05);与B组比较,C组心室肌细胞Ik1电流密度升高(P均<0.05).与A组比较,B组心室肌细胞APD20、APD50、APD90均延长(P均<0.05);与B组比较,C组B组心室肌细胞APD20、APD50、APD90均缩短(P均<0.05).结论 CnAβ基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞Ik1电流密度升高,心室肌细胞APD20、APD50、APD90均降低.CnAβ可能通过调节Ik1电流密度减小、APD延长参与心室肥大的发生发展.
关键词：钙调神经磷酸酶心肌动作电位内向整流钾电流心室肥大
分类号：R541.7(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81260040)国家临床重点专科建设项目(2013-544)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 31-34 )
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