原因不明复发性自然流产患者外周血IL-6、let-7d-5p水平变化及其关系
谷兆琪1
尹训强2
王东梅3
张云虹2
魏然4
张振4
朱肖肖4
郭强4
周宪宾4
褚楚4
赵霖4
李霞4
1.济南大学 山东省医学科学院医学与生命科学学院,济南 250200;山东省医学科学院基础医学研究所;临沂市妇女儿童医院2.济南大学 山东省医学科学院医学与生命科学学院,济南 250200;山东省医学科学院基础医学研究所3.山东中医药大学附属医院4.山东省医学科学院基础医学研究所
摘要：目的 观察原因不明复发性自然流产 (URSA) 患者外周血白细胞介素6 (IL-6) 、微小核糖核酸 (miRNA) let-7d-5p水平变化, 探讨二者在URSA发病中的关系.方法 选取正常早孕妇女 (正常妊娠组) 和URSA患者 (URSA组) 各30例, 空腹抽取其外周静脉血, ELISA法检测血清IL-6蛋白, q PCR法检测单个核细胞 (PBMC) 中的let-7d-5p.采用Target Scan生物信息软件, 以Target Scan 7. 1程序预测let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'非翻译区 (3'UTR) 是否存在潜在结合位点;将293T细胞分为干预组和对照组, 分别同时转染let-7d-5p (空白对照NC) 与野生型或突变型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因pmir GLO载体, 采用双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶报告基因活性.将293T细胞分为3组, 过表达组、抑表达组利用Lipofectamine 2000转染let-7d-5p mimics及inhibitor, 空白对照组转染阴性对照引物;转染24 h后收集细胞, q PCR检测各组细胞中的IL-6 mRNA, ELISA检测各组培养上清液中的IL-6.结果 与正常妊娠组比较, URSA组外周血IL-6蛋白水平升高, 而PBMC中let-7d-5p表达降低 (P均<0. 05) .Target Scan 7. 1程序预测显示, let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'UTR之间具有潜在的碱基互补结合位点;双荧光素酶报告基因系统检测显示, 与对照组比较, 干预组能降低野生型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因活性 (P <0. 05) , 但对突变型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因活性无明显影响 (P> 0. 05) .与空白对照组比较, 过表达组细胞中IL-6 mRNA表达及细胞上清液中IL-6水平降低 (P均<0. 05) , 抑表达组细胞中IL-6 mRNA表达及细胞上清液中IL-6水平升高 (P均<0. 05) .结论 URSA患者血清IL-6蛋白水平升高, 而PBMC中let-7d-5p表达降低; let-7d-5p与IL-6 mRNA 3'UTR结合并抑制IL-6表达, 靶向let-7d-5p调控IL-6表达可能成为URSA治疗的有效途径.
关键词：原因不明复发性自然流产微小核糖核酸白细胞介素6母胎免疫耐受生殖免疫
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81873337)国家自然科学基金(81704116)山东省自然科学基金(ZR2017PH008)山东省自然科学基金(ZR2018PH042)山东省自然科学基金(ZR2013HQ038)山东省重点研发项目(2016GSF202016)山东省中医药科技发展计划(2017-174)山东省中医药科技发展计划(2013-217)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 23-27 )
英文信息