HIF-3α对肝细胞癌多药耐药的影响及其机制
占静
何晓晓
邱梦君
孙飞
魏柏
1.华中科技大学同济医学院附属梨园医院,武汉,4300772.华中科技大学同济医学院附属梨园医院,武汉,4300773.华中科技大学同济医学院附属梨园医院,武汉,4300774.华中科技大学同济医学院附属梨园医院,武汉,4300775.华中科技大学同济医学院附属梨园医院,武汉,430077
摘要：目的 探讨缺氧诱导因子3α(HIF-3α)对肝细胞癌多药耐药的影响及其机制.方法 构建HIF-3α过表达慢病毒并鉴定;包装慢病毒,并测定慢病毒滴度.体外常规培养HepG2细胞,选择传2代、对数生长期、生长状态良好细胞,随机分为HIF-3α组、阴性对照组、空白对照组.HIF-3α组和阴性对照组分别转染HIF-3α过表达慢病毒、GV287空载体,空白对照组不予转染.收集各组转染72 h细胞,采用real-time PCR法检测HIF-3α、多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)、肺耐药蛋白(LRP)、谷胱甘肽硫转移酶pi(GST-pi)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)mRNA表达.结果 本研究成功构建了HIF-3α过表达慢病毒,其测序结果与GeneBank中HIF-3α的基因编码序列完全一致.该基因编码序列慢病毒包装后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,说明慢病毒包装成功,经计算,慢病毒滴度为1.0×108 TU/mL.HIF-3α组HIF-3αmRNA相对表达量明显高于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05),而阴性对照组与空白对照组比较P>0.05.HIF-3α组GST-pi、LRP mRNA相对表达量均明显高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05),MDR1、MRP2、TopoⅡαmRNA相对表达量组间两两比较P均>0.05.结论HIF-3α可能与肝细胞癌多药耐药有关,其机制与上调多药耐药相关基因GST-pi、LRP表达有关.
关键词：肝细胞癌缺氧诱导因子3α多药耐药基因慢病毒载体
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 50-53 )
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