Cripto-1 siRNA联合5-FU对大肠癌细胞增殖和迁移的影响及与EMT的关系
华丽1
周燕红2
游红霞2
1.湖北医药学院,湖北十堰,4420002.湖北科技学院
摘要：目的 观察小干扰RNA(siRNA)技术沉默大肠癌细胞中Cripto-1表达联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞增殖和迁移的影响,并探讨其与上皮间质转化(EMT)的关系.方法 体外培养人大肠癌Lovo细胞,将细胞分为正常对照组、Cripto-1 siRNA组、5-FU组、联合组.正常对照组加入含10％胎牛血清的RPMI1640培养液中常规培养48 h;Cripto-1 siRNA组加入100μL无血清Opti-MEM培养基、8μL LipofectamineTM2000、10μL siRNA混匀,进行转染,转染完成后更换普通培养基继续培养48 h;5-FU组加入10 mg/L 5-FU培养48 h;联合组先按Cripto-1 siR-NA组的方法进行转染,然后加入10 mg/L 5-FU继续培养48 h.采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Transwell实验观察细胞的迁移能力,Western blotting法检测细胞中Cripto-1蛋白及上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物Snail蛋白的相对表达量.结果 Cripto-1 siRNA、5-FU组、联合组的细胞增殖率均低于正常对照组(P均<0.05),联合组细胞细胞增殖率低于Cripto-1 siRNA和5-FU组(P均<0.05),Cripto-1 siRNA组与5-FU组比较差异无统计学意义(P>0.05).Cripto-1 siRNA、5-FU组、联合组的细胞迁移数较正常对照组减少(P均<0.05),联合组细胞迁移数较Cripto-1 siRNA组和5-FU组减少(P均<0.05),5-FU组较Cripto-1 siRNA组减少(P<0.05).Cripto-1 siRNA组、5-FU组、联合组Cripto-1和Snail蛋白表达低于正常对照组,E-cadherin蛋白表达高于正常对照组(P均<0.05);联合组Cripto-1和Snail蛋白表达低于Cripto-1 siRNA组、5-FU组,E-cadherin蛋白表达高于Cripto-1 siRNA组、5-FU组(P均<0.05);Cripto-1 siRNA组与5-FU组各蛋白表达比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 采用siRNA技术沉默大肠癌细胞中的Cripto-1表达,可增强5-FU对大肠癌细胞增殖和迁移的抑制作用,Cripto-1可能通过介导EMT促进大肠癌的发生发展.
关键词：大肠癌Cripto-1基因5-氟尿嘧啶细胞增殖细胞迁移上皮间质转化
分类号：R735.34(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(WJ2019M092)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 16-19 )
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