以慢病毒为载体的人骨肉瘤细胞肾上腺髓质素RNA干扰体系的构建
戴星1
杨康平1
尹战海1
马巍1
杨益民1
周晓玲1
姚璐2
1.西安交通大学第一附属医院,西安,7100612.西安交通大学医学部基础医学院
摘要：目的 以人骨肉瘤细胞的肾上腺髓质素(ADM)为作用靶点,建立以慢病毒为载体的RNA干扰体系,以高效抑制ADM基因的表达.方法 构建慢病毒载体,设计3条针对ADM基因序列的shRNA序列(shRNA-1、2、3),靶向ADM shRNA与慢病毒载体连接后,挑选LV-ADM-shRNA阳性克隆进行PCR鉴定并测序.经测序确认寡核苷酸插入部位正确后,提取目的质粒LV-ADM-shRNA 1、2、3,在293T细胞中包装携带目的质粒的慢病毒,然后采用多孔稀释法测定慢病毒滴度.结果 构建3条靶向ADM的LV-shRNA慢病毒载体,并获得较高滴度的慢病毒颗粒.结论 成功建立以慢病毒为载体的人骨肉瘤细胞ADM RNA干扰体系.
关键词：RNA干扰体系肾上腺髓质素慢病毒载体骨肉瘤细胞
分类号：R738.1(运动系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81702669)国家自然科学基金(31300899)陕西省重点研发计划资助项目(2017SF-231)陕西省自然科学基金(2018JM7035)中央高校基本科研业务费专项(XJJ2018046)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1-4 )
英文信息