Hsp90抑制剂WH-4对肝癌细胞株SK-HEP-1增殖、凋亡及耐药基因表达的影响观察
徐单单1
王颖2
陈素红1
1.广东食品药品职业学院生物技术学院,广州510520;暨南大学生命科学技术学院2.仲恺农业工程学院食品学院
摘要：目的 探讨Hsp90抑制剂WH-4对肝癌细胞SK-HEP-1增殖、凋亡及耐药基因表达的影响.方法 将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A、B、C组,A组分别加入0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L WH-4,B组分别加入0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L 17-AAG,C组加入等量生理盐水,培养48 h后,采用MTT法测算各组肝癌细胞SK-HEP-1增殖抑制率,并计算IC50.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A1、B1、C1组,分别加入2.3μmol/L WH-4、2.6μmol/L 17-AAG及生理盐水,培养48 h后,采用BrdU法观察肝癌细胞SK-HEP-1增殖活性.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A2、B2、C2组,分别加入2.25μmol/L WH-4、2.80μmol/L 17-AAG、生理盐水,培养48 h后,采用软琼脂平板实验检测肝癌细胞SK-HEP-1克隆形成率,流式细胞术检测肝癌细胞SK-HEP-1凋亡率,采用Western blotting法检测肝癌细胞SK-HEP-1凋亡蛋白Bcl2、Bax、Bcl-xL.将肝癌细胞SK-HEP-1随机分为A3、B3、C3组,分别加入2.30μmol/L WH-4、2.65μmol/L 17-AAG及生理盐水.培养48 h后,采用qPCR法检测耐药基因ABCB1、ABCG2.结果 WH-4对肝癌细胞SK-HEP-1有抑制作用,且呈浓度依赖性(R2=0.647(48h),P均<0.05),IC50为(2.35±0.25)μmol/L.与C1组相比,A1、B1组SK-HEP-1绿色荧光减弱.A2、B2组克隆形成率相比,P<0.05.与B2组比较,A2组细胞凋亡率升高(t=0.342,P<0.05),Bax蛋白相对表达量升高,B淋巴细胞瘤-2基因及Bcl-xL蛋白相对表达量降低.A3组ABCB1、ABCG2基因相对表达量低于B3组(t分别为-8.88、-13.00,P均<0.05).结论 Hsp90抑制剂WH-4对肝癌细胞SK-HEP-1具有增殖抑制、诱导凋亡作用,同时可降低耐药基因的表达.
关键词：热休克蛋白90抑制剂WH-4肝癌B淋巴细胞瘤-2基因B淋巴细胞瘤-2基因相关蛋白多药耐药基因ABCB1乳腺癌耐药蛋白
分类号：R446.6(诊断学)
资助基金：广东医学科研基金(A2018238)广东食品药品职业学院校级课题(2016YZ001)广州市科技计划(201904010050)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 10-14 )
英文信息