TGF-β诱导早期基因1对MG-63细胞成骨分化能力的调控作用及其机制
延育强1
唐蓉1
刘小溪1
高博宇2
殷霄1
1.西安交通大学医学院附属西安市中心医院,西安,7100032.榆林市中医医院
摘要：目的 探讨TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)在MG-63细胞成骨分化过程中的作用及可能机制.方法 将表达抑制TIEG1基因的shRNA质粒用Lipofectamine2000转染到MG-63细胞中,筛选出稳定表达shRNA细胞株即MG-63/TIEG1 KD细胞.用实时定量PCR法和Western blotting法检测MG-63/TIEG1 KD细胞与正常MG-63(MG-63/WT)细胞TIEG1基因及蛋白表达,以验证TIEG1的敲减效果.用成骨分化培养液诱导MG-63/WT及MG-63/TIEG1 KD细胞分化4周,检测两种细胞碱性磷酸酶(ALP)分泌活性及形成的矿化结节,比较二者分化矿化能力的差异.之后将两种细胞用成骨分化培养液培养7 d后收集细胞,实时定量PCR法、Western blotting法检测成骨分化标志物Runx2及Wnt信号通路下游核心分子β-catenin表达;免疫荧光观察β-catenin蛋白表达情况及细胞定位.结果 建立了稳定TIEG1敲减的细胞株MG-63/TIEG1 KD,其TIEG1 mRNA和蛋白表达量低于MG-63/WT细胞(P均<0.05).诱导分化后,MG-63/TIEG1 KD的ALP分泌活性及矿化结节形成能力均低于MG-63/WT细胞(P均<0.05),其Runx2、β-catenin的mRNA及蛋白表达量均低于MG-63/WT细胞(P均<0.05).结论 TIEG1通过调节Wnt/β-catenin信号通路促进MG-63成骨分化及矿化形成能力.
关键词：成骨分化MG-63细胞TGF-β诱导早期基因1Wnt信号通路碱性磷酸酶
分类号：R336(人体生理学)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 38-41 )
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