外源性锌离子培养/低氧环境下大鼠Müller细胞活力、锌离子浓度变化及促红细胞生成素的调节作用观察
康道欢
史彩平
1.浙江大学医学院附属儿童医院/国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,杭州3100032.浙江大学医学院附属儿童医院/国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,杭州310003
摘要：目的 观察加入外源性锌离子培养/低氧环境下大鼠Müller细胞系rMC-1细胞活力、锌离子浓度变化及促红细胞生成素(EPO)的调节作用.方法 将rMC-1细胞分为ZnCl2组、ZnCl2+EPO组、正常对照组,分别加入ZnCl2、ZnCl2+EPO、等量培养基,继续培养24 h后,采用MTT法检测各组细胞光密度值,计算细胞活力,采用TUNEL法检测各组细胞凋亡率.将rMC-1细胞分为CoCl2组、CoCl2+EPO组、正常对照组,分别加入CoCl2(诱导低氧环境)、CoCl2+EPO、等量培养基,采用锌离子探针FluoZin-3 AM检测各组细胞荧光强度(以荧光强度表示细胞内锌离子浓度),采用qRT-PCR法检测各组rMC-1细胞内ZnT8 mRNA,采用Western blotting法检测各组rMC-1细胞内ZnT8蛋白.结果 ZnCl2组、ZnCl2+EPO组、正常对照组rMC-1细胞活力分别为0.252±0.034、0.342±0.031、0.513±0.040,组间相比,P均<0.05;ZnCl2组、ZnCl2+EPO组、正常对照组rMC-1细胞凋亡率分别为60.326％ ±5.230％、28.268％ ±3.756％、15.124％ ±3.521％,组间相比,P均<0.01.CoCl2组、CoCl2+EPO组、正常对照组rMC-1细胞内锌离子浓度分别为6.712％ ±1.251％、4.723％ ±0.892％、3.428％ ±0.522％,组间相比,P均<0.05;CoCl2组rMC-1细胞中ZnT8 mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.224±0.038、2.436±0.187,CoCl2+EPO组分别为0.314±0.030、3.082±0.247,正常对照组分别为0.385±0.025、3.583±0.256,组间相比,P均<0.01.结论 外源性锌离子可引起rMC-1细胞活力下降、细胞凋亡率增加,EPO可拮抗此作用.低氧状态下rMC-1细胞内锌离子浓度增加,加入EPO后降低,其机制可能与ZnT8表达升高有关.
关键词：Müller细胞系细胞实验锌离子促红细胞生成素细胞活力细胞凋亡锌离子转运体8
分类号：R34(基础医学)
论文发表日期：2019-12-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 50-53 )
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