木犀草素与白藜芦醇联合应用对人肝癌细胞凋亡的影响及机制
乐炜
王超
邓波
章永
1.咸宁市中心医院,湖北咸宁4370002.咸宁市中心医院,湖北咸宁4370003.咸宁市中心医院,湖北咸宁4370004.咸宁市中心医院,湖北咸宁437000
摘要：目的 探讨木犀草素(Res)与白藜芦醇(Lut)联合应用对人肝癌细胞(HepG2)凋亡的影响及机制.方法 常规培养HepG2、人正常肝细胞(LO2),将部分对数生长期的HepG2、LO2细胞分别用(终浓度为0、5、10、20μmol/L)Lut、(0、12.5、25、50μmol/L)Res及5μmol/L Lut+12.5μmol/L Res、5μmol/L Lut+25μmol/L Res、5μmol/L Lut+50μmol/L Res、10μmol/L Lut+12.5μmol/L Res、10μmol/L Lut+25μmol/L Res、10μmol/L Lut+50μmol/L Res、20μmol/L Lut+12.5μmol/L Res、20μmol/L Lut+25μmol/L Res、20μmol/L Lut+50μmol/L Res、10μmol/L索拉非尼的无血清DMEM培养基培养24 h.用MTT实验检测细胞活力;倒置显微镜下观察细胞的生长及形态变化,用DAPI染色法检测细胞凋亡;采用免疫荧光实验观察核因子κB(NF-κB)的入核情况;用Western blot-ting法检测细胞内NF-κB及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-3)的表达;用qRT-PCR技术检测细胞内凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-3)mRNA表达.结果 与未经药物处理的细胞相比,经10、20μmol/L Lut及25、50μmol/L Res单独处理后HepG2细胞相对存活率低(P均<0.05);Lut与Res联合处理24 h后HepG2细胞相对存活率低(P均<0.05);20μmol/L Lut+25μmol/L Res处理后HepG2细胞相对存活率最低(P均<0.05).各浓度Lut、Res及二者联合处理24 h对LO2细胞相对存活率无影响(P均>0.05);而索拉非尼处理24 h后LO2细胞相对存活率低(P<0.05).经20μmol/L Lut、25μmol/L Res、20μmol/L Lut+25μmol/L Res处理后,HepG2细胞逐渐固缩,膜局部破损,死亡细胞多.DAPI染色发现,HepG2细胞核出现不同程度的核固缩和染色体片段化,经20μmol/L Lut+25μmol/L Res处理后的HepG2细胞变化更明显.同时,药物处理对LO2的细胞形态和DAPI染色后核形态均无明显影响.经Lut 20μmol/L+Res 25μmol/L处理后HepG2细胞内p-NF-κB蛋白相对表达量最低(P均<0.05),HepG2细胞内NF-κB入核被明显抑制.经Lut 20μmol/L+Res 25μmol/L处理后HepG2细胞内Bax、Caspase-3表达最高,Bcl-2表达最低(P均<0.05).结论 Lut与Res联合应用可促进HepG2细胞凋亡;其作用机制可能与抑制NF-κB激活,调控凋亡相关蛋白表达有关.
关键词：肝癌木犀草素白藜芦醇细胞凋亡
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
论文发表日期：2020-01-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 35-39 )
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