高低淋巴结转移潜能鼻咽癌细胞与LEC共培养后目标细胞miR-92 a-3 p表达及其靶基因功能分析
蒋旭1
刘琦2
张莹2
姚茜3
韦正波2
谢莹3
1.广西医科大学生命科学研究院,广西南宁5300002.广西医科大学附属肿瘤医院3.广西医科大学生命科学研究院,广西南宁530000;广西区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室
摘要：目的 观察高低淋巴结转移潜能的鼻咽癌(NPC)细胞系5-8F(高淋巴结转移潜能)及6-10B(低淋巴结转移潜能)与淋巴管内皮细胞(LEC)共培养后各目标细胞中miR-92a-3p的表达情况,预测其靶基因并分析其功能,探讨其对NPC淋巴结转移的影响及作用机制.方法 依据Transwell上下室接种细胞的不同进行分组,LEC+5-8F组Transwell上室接种LEC、下室接种5-8F细胞,LEC+6-10B组上室接种LEC、下室接种6-10B细胞,5-8F+LEC组上室接种5-8F细胞、下室接种LEC,6-10B+LEC组上室接种6-10B细胞、下室接种LEC,作为对照的LEC组、5-8F组、6-10B组分别接种LEC、5-8F细胞、6-10B细胞于6孔板中,以共培养后的Transwell上室细胞和6孔板培养的单细胞为目标细胞.各组细胞培养48 h时,采用qRT-PCR法检测各组目标细胞中miR-92a-3p.通过4个miRNA靶基因预测网站miRDB、miRTarbase、miRWalk、TargetScan预测miR-92a-3p的靶基因并取交集,使用KOBAS3.0在线网站对共同预测的靶基因进行KEGG通路分析.结果 LEC+5-8F组、LEC+6-10B组、LEC组细胞中miR-92a-3p的相对表达量分别为605.00±119.00、46.30±11.40、1.01±0.16,组间相比,P均<0.05.5-8F+LEC组、5-8F组细胞中miR-92a-3p的相对表达量分别为212.00±39.40、1.00±0.08,组间相比,P<0.05.6-10B+LEC组、6-10B组细胞中miR-92a-3p的相对表达量分别为4.14±0.87、1.02±0.24,组间相比,P<0.05.有74个基因被4个miR-NA靶基因预测网站共同预测为miR-92a-3p的靶基因,富集在TGFβ、PI3k/Akt、AMPK、mToR以及钙信号通路等与肿瘤转移相关的通路上.结论 高低淋巴结转移潜能的NPC细胞系与LEC共培养后目标细胞中miR-92a-3p表达均升高,NPC细胞系与LEC共培养后细胞中miR-92a-3p的表达水平与淋巴结转移潜能有关,miR-92a-3p可能是NPC淋巴结转移的潜在标志物.
关键词：微小RNAmiR-92a-3p鼻咽癌鼻咽癌细胞系淋巴管内皮细胞
分类号：R739.62(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81760361)广西自然科学基金面上项目(2017GXNSFAA198064)
论文发表日期：2020-03-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 22-26 )
英文信息