山慈菇提取物对肝癌细胞Huh7增殖、凋亡的影响及其机制
方健
王辰男
孟庆刚
1.北京中医药大学,北京1000292.北京中医药大学,北京1000293.北京中医药大学,北京100029
摘要：目的 探讨山慈菇提取物(CAE)对肝癌细胞Huh7增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养Huh7细胞,使用不同浓度(10、20、30 mg/mL)CAE处理24 h;采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测miR-329-3p及含跨膜Bax抑制剂的母体6(TMBIM6)mRNA表达,Western blotting法检测TMBIM6及Cyclin D1、p21、Bcl-2、Bax蛋白表达.双荧光素酶报告实验验证miR-329-3p与TMBIM6的靶向关系.将细胞分为CAE+anti-miR-329-3p组、CAE+anti-miR-NC组,分别转染miR-329-3p特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-329-3p)及其阴性对照(anti-miR-NC),并加入含有30 mg/mL的CAE处理24 h.参照上法检测细胞存活率、细胞凋亡率、miR-329-3p表达、TMBIM6及凋亡相关蛋白表达.结果 随着加入CAE浓度的升高,细胞存活率、TMBIM6 mRNA及蛋白、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达均逐渐降低,细胞凋亡率、miR-329-3p表达、p21及Bax蛋白表达均逐渐升高(P均<0.05).双荧光素酶报告实验结果显示,miR-329-3p能够靶向结合TMBIM6.与CAE+anti-miR-NC组比较,CAE+anti-miR-329-3p组细胞存活率及TMBIM6、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达升高,细胞凋亡率、miR-329-3p表达及p21、Bax蛋白表达均降低(P均<0.01).结论 CAE可抑制肝癌细胞Huh7增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与激活miR-329-3p表达并负向调控其靶基因TMBIM6有关.
关键词：肝癌山慈菇提取物miR-329-3pTMBIM6蛋白细胞增殖细胞凋亡
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
论文发表日期：2020-04-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 11-15 )
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