CASC19低表达对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及机制
王晓昆
张伟
周美娟
谢琦
1.廊坊市人民医院,河北廊坊0650002.廊坊市人民医院,河北廊坊0650003.廊坊市人民医院,河北廊坊0650004.廊坊市人民医院,河北廊坊065000
摘要：目的 探讨癌症易感候选基因19(CASC19)低表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡的影响及机制.方法 常规培养人口腔角质细胞NOK及OSCC细胞SCC9、HSC3、CAL-27,并用实时荧光定量PCR法确定SCC9细胞作为实验细胞.取对数生长期SCC9细胞并随机分组,用脂质体法将CASC19过表达对照质粒(pcD-NA)、CASC19过表达质粒(pcDNA-CASC19)、CASC19抑制表达对照质粒(si-NC)、CASC19抑制表达质粒(si-CASC19)、miR-802阴性对照质粒(miR-NC)、miR-802模拟物(miR-802)分别转染至pcDNA组、pcDNA-CASC19组、si-NC组、si-CASC19组、miR-NC组、miR-802组;将si-CASC19与miR-802抑制剂阴性对照质粒(anti-miR-NC)、miR-802抑制剂(anti-miR-802)共转染至si-CASC19+anti-miR-NC组、si-CASC19+anti-miR-802组,用实时荧光定量PCR法检测细胞内miR-802、CASC19表达确认转染效率.用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA CASC19与miR-802的靶向关系,Western blotting法检测细胞内细胞周蛋白D1(Cyclin D1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 CASC19与miR-802存在结合位点.与pcDNA组比较,pcDNA-CASC19组miR-802相对表达量低(P<0.05);与si-NC组比较,si-CASC19组miR-802相对表达量高.细胞培养48、72 h,与si-NC组比较,si-CASC19组OD值低,细胞凋亡率高,Cyc-lin D1、Bcl-2蛋白表达低,p21、Bax蛋白表达高(P均<0.05).与si-NC组比较,si-CASC19组培养48、72 h细胞增殖活力低,细胞凋亡率高,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量低,p21、Bax蛋白相对表达量高(P均<0.05);与si-CASC19+anti-miR-NC组比较,si-CASC19+anti-miR-802组培养48、72 h细胞增殖活力高,细胞凋亡率低,Cyclin D1、Bcl-2蛋白相对表达量高,p21、Bax蛋白相对表达量低(P均<0.05).结论 CASC19低表达可抑制OSCC细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与靶向调控miR-802表达有关.
关键词：口腔鳞状细胞癌癌症易感候选基因19微小RNA-802细胞增殖细胞凋亡
分类号：R739.8(口腔、颌面部肿瘤)
论文发表日期：2020-06-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 38-42 )
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