饥饿诱导三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的自噬应答观察
刘宇坤1
胡杨2
卯升义3
许安永4
邹迪2
熊喆2
成文敏3
赵红业5
1.大理大学药学与化学学院,大理671000;云南省动物基因编辑与体细胞克隆技术重点实验室;云南省异种器官移植工程研究中心2.云南省动物基因编辑与体细胞克隆技术重点实验室;云南农业大学植物保护学院;云南省异种器官移植工程研究中心3.云南省动物基因编辑与体细胞克隆技术重点实验室;云南农业大学动物科学技术学院;云南省异种器官移植工程研究中心4.云南农业大学植物保护学院5.大理大学药学与化学学院,大理671000;云南省动物基因编辑与体细胞克隆技术重点实验室;云南农业大学植物保护学院;云南省异种器官移植工程研究中心
摘要：目的 观察饥饿诱导三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的自噬应答情况,并探讨其相关分子机制.方法 将MDA-MB-231细胞分为四组,对照组加入DMEM培养液正常培养;Baf-A1组在DMEM培养液中加入100 nM的Baf-A1;EBSS(饥饿)组加入EBSS培养液;EBSS+ Baf-A1(自噬阻断)组在EBSS培养液中加入100 nM的Baf-A1,四组均处理8h后,分别采用实时荧光定量法和Western blotting法检测各组微管相关蛋白轻链3(LC3B)、自噬相关蛋白7(ATG7)和自噬相关蛋白4A (ATG4A)的mRNA及蛋白.结果 与对照组比较,EBSS组LC3B、ATG7 mRNA相对表达量升高,ATG4A mRNA相对表达量降低;与EBSS组比较,EBSS+ Baf-A1组LC3B mRNA相对表达量升高、ATG7 mRNA相对表达量降低,与Baf-A1组对比,EBSS+Baf-A1组中LC3B mRNA相对表达量增加,ATG7和ATG4A mRNA相对表达量降低.与对照组比较,EBSS组LC3BⅡ/LC3BⅠ升高,ATG4A蛋白表达降低;与EBSS组比较,EBSS+ Baf-A1组LC3BⅡ/LC3BⅠ增加,ATG7蛋白表达降低;与Baf-A1组相比,EBSS+ Baf-A1组LC3BⅡ/LC3BⅠ增加,ATG7蛋白表达降低.结论 EBSS处理的MDA-MB-231细胞自噬水平升高,细胞自噬体形成增多,在此过程中EBSS可能通过增加ATG7 mRNA的表达量增加细胞自噬水平.
关键词：细胞自噬饥饿微管相关蛋白轻链3自噬相关基因ATG7自噬相关蛋白4A三阴性乳腺癌
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81872452)国家自然科学基金(31660656)云南省科技计划(2016FA010)
论文发表日期：2020-06-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 21-24 )
英文信息