抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8表达对小鼠胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌功能的影响观察
张艳
王晨菲
王思瑶
罗荔
1.新疆医科大学第五附属医院,乌鲁木齐8300112.新疆医科大学第五附属医院,乌鲁木齐8300113.新疆医科大学第五附属医院,乌鲁木齐8300114.新疆医科大学第五附属医院,乌鲁木齐830011
摘要:目的 观察抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8(CDK8)表达对MIN6胰岛β细胞胰岛素分泌功能及细胞增殖的影响,并探讨其可能作用机制.方法 将培养好的MIN6细胞分为3组,观察组转染siRNA-CDK8慢病毒液(可抑制细胞CDK8表达),空白组不给予任何干预,对照组转染siRNA-NC慢病毒液(阴性对照),培养48 h.CCK-8检测各组细胞增殖活性(OD值),流式细胞术观察各组细胞周期分布,ELISA法检测各组细胞上清液胰岛素,荧光定量PCR法检测各组细胞CDK8、胰岛素合成相关转录因子(PDX1、INS2和MAFA)、胰岛素转运相关因子GLUT2mRNA,Western blotting检测各组细胞CDK8、细胞周期蛋白(Cyclin)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)、增殖细胞核抗原(PCNA).结果 与对照组及空白组比较,观察组细胞OD值降低,G0/G1、S期细胞比例增加,细胞上清液胰岛素水平降低,CDK8、PDX1、INS、MAFA、GLUT2 mRNA相对表达量降低(P均<0.05).与对照组及空白组比较,观察组CDK8、Cyclin D1、PCNA、PPARγ蛋白相对表达量降低(P均<0.01).结论 抑制CDK8表达的MIN6细胞,细胞增殖活性显著下降,胰岛素分泌减少,其机制可能与抑制Cyclin D1、PCNA及PPARγ蛋白表达相关.
关键词:细胞周期素依赖蛋白激酶8胰腺β细胞胰岛素糖尿病胰岛素合成相关转录因子胰岛素转运相关因子细胞周期蛋白过氧化物酶体增殖剂激活受体γ增殖细胞核抗原
分类号:R587(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金:新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(2016D01C241)
论文发表日期:2020-06-25
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 35-39 )
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山东医药

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ISSN:1002-266X
年,卷(期):2020,60(18)
所属栏目:论著