转染葡萄糖神经酰胺合成酶小干扰RNA的胃癌细胞株SGC7901、SGC7901/DDP凋亡观察
张俊杰
葛艳丽
王声乐
王喆
王志荣
1.同济大学附属同济医院,上海2000652.同济大学附属同济医院,上海2000653.同济大学附属同济医院,上海2000654.同济大学附属同济医院,上海2000655.同济大学附属同济医院,上海200065
摘要:目的 观察转染葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)小干扰RNA的胃癌细胞株SGC7901、顺铂耐药胃癌细胞株SGC7901/DDP凋亡情况,并探讨其机制.方法 取正常胃黏膜上皮细胞株GES-1(GES-1组)、人胃癌细胞株SGC7901(SGC7901组)、顺铂耐药人胃癌细胞株SGC7901/DDP(SGC7901/DDP组),转染GCS小干扰RNA后继续培养48 h,使用流式细胞仪检测各组凋亡细胞数,计算凋亡指数;采用Real-time PCR法检测各组细胞中MDR-1、BCL2、BAX mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞中P-糖蛋白(P-gp)、BCL2、BAX、Caspase3蛋白.结果 SGC7901组、SGC7901+SiRNA组细胞凋亡指数分别为0.36±0.05、14.98±1.01,两组相比,P<0.05;SGC7901/DDP组、SGC7901/DDP+SiRNA组细胞凋亡指数分别为0.18±0.02、12.75±0.68,两组相比,P<0.05.SGC7901/DDP+SiRNA组、SGC7901+SiRNA组细胞凋亡指数分别为12.75±0.68、14.98±1.01,两组相比,P<0.05.SGC7901组细胞中MDR-1、BCL2 mRNA的相对表达量高于SGC7901+SiRNA组(P<0.05),BAX mRNA的相对表达量低于SGC7901+SiRNA组(P<0.05);SGC7901/DDP组细胞中MDR-1、BCL2 mRNA的相对表达量高于SGC7901/DDP+SiRNA组(P<0.05),BAX mRNA的相对表达量低于SGC7901/DDP+SiRNA组(P<0.05);SGC7901/DDP组细胞中MDR-1 mRNA的相对表达量高于SGC7901组(P<0.05),SGC7901/DDP+SiRNA组细胞中MDR-1 mRNA的相对表达量高于SGC7901+SiRNA组(P<0.05).SGC7901组细胞中P-gp、BCL2蛋白的相对表达量高于SGC7901+SiRNA组(P<0.05),BAX、Caspase3蛋白的相对表达量低于SGC7901+SiRNA组(P<0.05);SGC7901/DDP组细胞中P-gp、BCL2蛋白的相对表达量高于SGC7901/DDP+SiRNA组(P<0.05),BAX、Caspase3蛋白的相对表达量低于SGC7901/DDP+SiRNA组(P<0.05);SGC7901/DDP组细胞中P-gp蛋白的相对表达量高于SGC7901组(P<0.05),SGC7901/DDP+SiRNA组细胞中P-gp蛋白的相对表达量高于SGC7901+SiRNA组(P<0.05).结论 转染GCS SiRNA可促进胃癌细胞株SGC7901、胃癌顺铂耐药株SGC7901/DDP凋亡,其机制可能与调节凋亡通路中的BCL2、BAX、Caspase3蛋白表达有关;GCS可能通过MDR-1通路影响胃癌细胞的多药耐药.
关键词:葡萄糖神经酰胺合成酶小干扰RNA胃癌肿瘤多药耐药细胞凋亡细胞实验
分类号:R735.2(消化系肿瘤)
资助基金:上海市卫生与计划生育委员会青年科学基金项目(20124Y100)
论文发表日期:2020-11-25
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 6-9 )
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