分离白细胞法、低渗红细胞法、全血直提法提取的冻存血RNA质量及其反转录后基因扩增效果
刘欣1
彭贺含2
唐晓慧3
杨四梅4
赵商岐3
郑佳3
周晓涛5
1.新疆医科大学研究生院,新疆乌鲁木齐830011;新疆昌吉职业技术学院2.新疆中医学院3.新疆医科大学研究生院,新疆乌鲁木齐8300114.新疆军区总医院5.新疆医科大学基础医学院
摘要：目的 观察分离白细胞法、低渗红细胞法、全血直提法提取的冻存血RNA质量及其反转录后基因扩增效果.方法 将冻存血标本12例份随机分为3组,分别采用分离白细胞法、低渗红细胞法、全血直提法提取RNA,提取出的RNA溶液分别记为A、B、C组.使用NANODROP 1000分光光度计测算各组RNA浓度及OD(A260/A280)值、OD(A260/A230)值,以OD(A260/A280)值、OD(A260/A230)值表示RNA纯度.采用琼脂糖凝胶电泳法观察各组RNA完整性.各组RNA反转录后,采用PCR法扩增,观察扩增产物电泳条带情况;各组RNA反转录后,采用qPCR法扩增,计算循环阈值(Ct值).结果 A组RNA浓度、OD(A260/A280)值、OD(A260/A230)值均高于B、C组(P均<0.05).A组琼脂糖凝胶电泳没有出现任何条带,B组条带严重弥散,C组有条带存在.C组RNA反转录后得到的扩增产物条带最为明亮.A、B、C组Ct值分别为28.27±1.01、27.49±0.22、24.20±0.25,其中C组Ct值与A、B组相比,P均<0.05.结论 与分离白细胞法、低渗红细胞法相比,全血直提法提取的冻存血RNA完整性更好,其反转录后基因扩增效果更高.
关键词：RNA提取方法全血直提法分离白细胞法低渗红细胞法血液标本冻存血
分类号：R331(人体生理学)
资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金(2018D01C299)
论文发表日期：2020-11-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 43-46 )
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