大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的建立及其心功能和心肌细胞凋亡情况观察
唐咏文1
崔同涛2
刘勇1
王敏2
郭涛2
刘津1
谭宁1
1.广东省人民医院(广东省医学科学院),广州5100802.广州医科大学附属第一医院
摘要：目的 构建大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型,并通过观察其心肌细胞凋亡情况及心功能变化加以验证.方法 取SD大鼠42只,结扎心脏前降支血管制作心肌缺血模型,分别于结扎后1、4、6、12、24 h后打开线结观察5 min内再灌注情况以确定及时和延迟再灌注时间.将SD大鼠分为假手术组、及时再灌组和延迟再灌组,及时再灌组和延迟再灌组心肌缺血后分别按确定的时间予以再灌注,假手术组仅穿线不结扎.再灌注24 h,采用TTC/Evens Blue双染色法测算及时和延迟再灌组的梗死区、危险区面积、缺血区大小,改进TUNEL法检测三组缺血危险区心肌细胞凋亡情况,采用Western blotting法检测心肌细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及激活态Caspase-3(Cleaved Caspase-3);再灌注72 h,采用动物超声仪检查左心室形态及心功能指标左心室收缩末直径(LVDs)、左心室舒张末直径(LVDd)、左心室短轴缩短率(FS)、左心室收缩末容积(LVDsV)、左心室舒张末容积(LVDdV)、左心室射血分数(LVEF)、每搏射血量(SS)和心输出量(CO).结果 缺血12、24 h后均无法成功再灌注,缺血6 h后10只中仅2只成功再灌注,缺血1、4h后均成功再灌注,将缺血1h和4h分别作为及时和缺血再灌注时间.与及时再灌组比较,延迟再灌组坏死区、缺血区均增大(P均<0.05),危险区差异无统计学意义.及时再灌组和延迟再灌组的心肌细胞凋亡率高于假手术组,且延迟再灌组高于及时再灌组(P均<0.01).与假手术组比较,及时再灌组和延迟再灌组Bax、Cleaved Caspase-3表达均升高(P均<0.05或<0.01),Bcl-2蛋白无明显变化.与假手术组比较,延迟再灌组和及时再灌组FS、SS、LVEF、CO均下降(P均<0.01),且延迟再灌组LVDsV和LVEF均低于及时再灌组(P均<0.01).结论 SD大鼠心肌缺血4 h后可有效再灌注,并可导致明显的心肌细胞凋亡及左心室收缩功能下降,该模型可更好地模拟临床心肌延迟缺血再灌注损伤.
关键词：缺血再灌注细胞凋亡左心室功能BaxBcl-2Caspase-3大鼠
分类号：R541.4(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81270286)
论文发表日期：2021-02-04
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 18-21,25 )
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