自噬诱导、抑制的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ATG2A和ATG9A表达观察
杨鑫娇1
邹迪2
熊喆2
张海珠3
夏从龙3
赵红业1
1.大理大学药学院,云南大理671000;云南省动物基因编辑与体细胞克隆技术重点实验室;云南省异种器官移植工程研究中心2.云南省动物基因编辑与体细胞克隆技术重点实验室;云南省异种器官移植工程研究中心3.大理大学药学院,云南大理671000
摘要:目的 观察自噬诱导、抑制的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ATG2A、ATG9A表达变化.方法 人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231分为4组,对照组加入DMEM培养液正常培养,Baf-A1组在DMEM培养液中加100 nmol/L的巴弗洛霉素A1(Baf-A1)进行自噬阻断,EBSS组加入Earle's平衡盐溶液(EBSS)进行饥饿诱导细胞自噬,EBSS+Baf-A1组在EBSS培养液中加入100 nmol/L的Baf-A1,四组均培养4 h.采用实时荧光定量(Q-PCR)法检测各组细胞中ATG2A、ATG9A mRNA,采用Western Blotting法检测各组细胞中ATG2A、ATG9A、P62、微管蛋白1轻链3(LC3)蛋白,计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ.结果 与对照组、Baf-A1组相比,EBSS组、EBSS+Baf-A1组细胞中ATG2A、ATG9A mRNA相对表达量均显著升高(P均<0.05),且EBSS+Baf-A1组细胞中ATG9A mRNA相对表达量高于EBSS组(P均<0.05).与对照组、Baf-A1组相比,EBSS组、EBSS+Baf-A1组细胞中ATG2A蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05);EBSS组细胞中ATG9A蛋白相对表达量均高于其余三组(P均<0.05);EBSS组细胞中P62蛋白相对表达量均低于其余三组(P均<0.05),EBSS+Baf-A1组P62蛋白相对表达量低于对照组(P均<0.05);EBSS组细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均低于其余三组(P均<0.05),EBSS+Baf-A1组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均高于其余三组(P均<0.05).结论 EBSS成功诱导MDA-MB-231细胞发生自噬,饥饿诱导的MDA-MB-231细胞自噬过程中ATG2A、ATG9A mRNA和蛋白表达升高.
关键词:乳腺肿瘤三阴性乳腺癌ATG2A基因ATG9A基因细胞自噬MDA-MB-231细胞
分类号:R966(药理学)
资助基金:国家自然科学基金(81872452)
论文发表日期:2021-07-25
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 13-17 )
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