miR-191靶向调控SATB1对肝癌细胞增殖和侵袭的影响
陈红英1
高贵峰1
闫少茹2
王春艳2
王长友3
1.唐山市中医医院普外科,河北唐山0603002.唐山市人民医院骨科3.华北理工大学附属医院普外科
摘要：目的 探讨微小RNA-191(miR-191)靶向调控特异AT序列结合蛋白1(SATB1)对肝癌细胞增殖和侵袭的影响.方法 体外传代培养人肝癌细胞系HepG2、人肝正常细胞系L02(以下分别称HepG2、L02细胞).采用RT-PCR技术检测两种细胞miR-191、SATB1 mRNA表达,采用Western blotting法检测两种细胞SATB1蛋白表达.借助在线生物信息学软件starBase和TargetScan7.2预测miR-191与SATB1的结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-191与SATB1的靶向调控关系.取HepG2细胞,随机分为对照组、SATB1组、miR-191 mimic组、SATB1+miR-191 mimic组,对照组转染阴性对照质粒,SATB1组转染SATB1过表达质粒,miR-191 mimic组转染miR-191 mimic,SATB1+miR-191 mimic组转染SATB1过表达质粒和miR-191 mimic.收集各组细胞,采用MTT法检测细胞增殖能力,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,采用Western blotting法检测增殖相关蛋白Cyclin D1、p27及上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达.结果 HepG2细胞miR-191相对表达量低于L02细胞,而SATB1 mRNA和蛋白相对表达量均高于L02细胞(P均<0.01).经在线生物信息学软件starBase和TargetScan7.2预测和双荧光素酶报告基因实验验证,miR-191与SATB1存在靶向调控关系.培养72 h,miR-191 mimic组细胞增殖、侵袭能力均低于对照组和SATB1组(P均<0.05);而SATB1+miR-191 mimic组细胞增殖、侵袭能力均高于miR-191 mimic组(P均<0.05).与对照组和SATB1组比较,miR-191 mimic组Vimentin、N-cadherin、Cyclin D1蛋白相对表达量明显降低,E-cadherin、p27蛋白相对表达量明显升高(P均<0.05);与miR-191 mimic组比较,SATB1+miR-191 mimic组Vimentin、N-cadherin、Cyclin D1蛋白相对表达量明显升高,E-cadherin、p27蛋白相对表达量明显降低(P均<0.05).结论 miR-191通过靶向负调控SATB1抑制肝癌细胞增殖和侵袭,其机制可能与调控增殖相关蛋白Cyclin D1、p27及上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达有关.
关键词：肝癌微小RNA-191特异AT序列结合蛋白1细胞增殖细胞侵袭
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：河北省医学科学研究重点课题(201710096)
论文发表日期：2022-01-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 39-43 )
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