楝酰胺对肝癌细胞的促凋亡作用及其机制
楚蕾蕾1
高国伟2
杨桢桢1
杨留勤2
武莉萍2
1.新乡医学院第四临床学院,河南新乡4530002.新乡市中心医院放疗科
摘要：目的 观察加入楝酰胺(Rocaglamide,Roc-A)培养的人肝癌细胞株HepG2凋亡情况,并探讨其可能作用机制.方法 ①加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞凋亡情况观察:取对数生长期HepG2细胞,分为5组,分别加入0(空白对照)、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时取各组细胞,采用YF488-Annexin V/PI荧光双染法观察细胞凋亡情况.②加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞已糖激酶Ⅱ(HK2)、抑凋亡因子类似物(BCL2L1)mRNA检测:取对数生长期HepG2细胞,分为2组,分别加入0、100 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用RT-qPCR法检测细胞HK2及BCL2L1 mRNA.③加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞HK2、BCL2L1蛋白检测:取适量HepG2细胞,分为3组,分别加入0、100、200 nmol/L的Roc-A,培养24 h采用蛋白组学质谱分析法检测细胞HK2、BCL2L1蛋白.取对数生长期HepG2细胞分为5组,分别加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用Western Blotting法检测HK2、BCL2L1蛋白.④癌组织HK2表达与肝癌患者的生存时间关系分析:采用Kaplan Meier Plotter癌症数据库分析癌组织HK2表达与肝癌患者生存时间的关系.结果 加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液HepG2细胞凋亡率分别为0.83％ ±0.21％、9.46％ ±2.34％、24.68％ ±4.22％、39.60％ ±2.16％及58.63％±1.62％,组间两两比较,Р<0.05.随Roc-A溶液浓度增加,细胞凋亡率也随之增加.与空白对照比较,培养24 h时加入100 nmol/L Roc-A溶液的HepG2细胞HK2、BCL2L1 mRNA相对表达量均降低(Р均<0.05).与空白对照比较,加入不同浓度Roc-A培养HepG2细胞HK2、BCL2L1蛋白相对表量均降低(P均<0.05).与癌组织HK2高表达的肝癌患者比较,HK2低表达的肝癌患者的生存时间更长(Р<0.05).结论 Roc-A促进HepG2细胞的凋亡,200 nmol/L的Roc-A促进HepG2细胞凋亡能力最佳.Roc-A促HepG2细胞凋亡的机制可能为Roc-A抑制HepG2细胞HK2、BCL2L1 mRNA及蛋白的表达.
关键词：楝酰胺已糖激酶Ⅱ抑凋亡因子类似物细胞凋亡肝肿瘤肝癌
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81572939)
论文发表日期：2022-02-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 6-11 )
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