R406对人RASFs炎性因子分泌及生物学功能调节、关节炎小鼠关节炎症缓解作用观察
张玲1
徐鑫睿1
王林2
潘继红2
1.山东第一医科大学生物医学科学院暨山东省医药生物技术中心生物化学教研室,山东济南2.山东第一医科大学生物医学科学院暨山东省医药生物技术中心生物化学教研室,山东济南;山东第一医科大学第一附属医院类风湿关节炎科;国家卫健委生物医药重点实验室;山东省罕见病防治重点实验室生物化学教研室
摘要：目的 探讨R406(free base)对人类风湿关节炎关节滑膜成纤维细胞(RASFs)炎性因子分泌的抑制及生物学功能(侵袭、迁移和凋亡)的调节作用,观察R406对关节炎小鼠关节炎症的缓解作用.方法 取3～7代生长的RASFs,分为实验组、阴性对照组和阳性对照组.实验组分别用1、10、50、100 ng/mL R406和10 ng/mL IL-1β干预,阴性对照组加入DMSO,阳性对照组加入DMSO和10 ng/mL IL-1β干预.干预24 h,采用qRT-PCR法检测各组炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA.选择最适浓度(50 ng/mL)的R406作用于RASFs(实验组)不同时间(6、12、24、48 h),阴性对照组及阳性对照组处理方法同上,采用qRT-PCR检测各组IL-6、IL-8、CCL2 mRNA,ELISA法检测各组IL-6、IL-8、CCL2蛋白,Trans Well检测各组RASFs的侵袭能力;划痕法检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率.建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)模型鼠,将18只8周龄的DBA 1/J小鼠平均分为实验组、阴性对照组和阳性对照组.实验组诱发CIA后腹腔注射R406,200 mg/kg,每两天注射1次;阴性对照组不诱发CIA;阳性对照组诱发CIA后腹腔注射等量DMSO,每两天注射1次.R406治疗30 d后,ELISA法检测各组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP.结果 与阳性对照组比较,实验组中不同剂量R406作用后RASFs中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA表达被抑制,且在50 ng/mL时抑制效果最为显著(P均<0.01).与阳性对照组比较,实验组中50 ng/mL R406作用于RASFs不同时间,细胞中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2蛋白的表达均被抑制,且在24 h抑制效果最显著(P均<0.01);与阳性对照组比较,实验组RASFs上清液中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2水平降低(P均<0.01).与阳性对照组比较,实验组RASFs侵袭和迁移数均降低,凋亡率增加(P均<0.05).与阳性对照组比较,实验组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP水平降低(P均<0.01).结论 R406可以抑制RASFs中炎性因子的分泌,调节RASFs侵袭、迁移、凋亡能力,对CIA模型鼠关节炎症具有抑制作用.
关键词：脾酪氨酸蛋白激酶抑制剂R406类风湿关节炎滑膜成纤维细胞白细胞介素6白细胞介素8趋化因子配体2细胞生物学功能小鼠
分类号：R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(81671624)
论文发表日期：2022-05-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 49-54 )
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