敲低PRMT5对卵巢癌细胞多西紫杉醇化疗敏感性的影响及其机制
金男
杨洪艳
裴会
姜姗姗
李烁
中国医科大学附属盛京医院第五产科,沈阳110004
摘要：目的 探讨敲低蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)对卵巢癌细胞多西紫杉醇(DTX)化疗敏感性的影响及其机制.方法 体外培养人正常卵巢上皮细胞株IOSE80(以下称IOSE80细胞)及人卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2、A2780(以下分别称SKOV3、ES-2、A2780细胞),采用RT-qPCR法和Western blotting法检测各细胞PRMT5 mRNA和蛋白表达,选择PRMT5 mRNA和蛋白相对表达量最高的卵巢癌细胞进行后续实验.取传4代、对数生长期、生长状态良好的卵巢癌细胞,随机分为空白对照组、阴性对照组、siRNA-1组、siRNA-2组,空白对照组不予转染,阴性对照组转染阴性对照质粒,siRNA-1组转染PRMT5 siRNA-1质粒,siRNA-2组转染PRMT5 siRNA-2质粒,采用RT-qPCR法和Western blotting法检测各组PRMT5 mRNA和蛋白表达.取各组上述转染后细胞,分别给予1、5、10、15、20、25μmol/L DTX干预48 h,采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率.选择siRNA-1组和siRNA-2组中细胞增殖抑制率接近50％的DTX浓度进行后续实验.取各组上述转染后细胞,给予相应浓度DTX干预48 h,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,采用Ki67/Hoechst双染法检测细胞增殖情况,采用Western blotting法检测JAK1、JAK3、STAT6及p-JAK1、p-JAK3、p-STAT6蛋白表达.结果 SKOV3、ES-2、A2780细胞PRMT5 mRNA和蛋白相对表达量均高于IOSE80细胞(P均<0.05),SKOV3、ES-2、A2780细胞PRMT5 mRNA和蛋白相对表达量两两比较差异均无统计学意义(P均>0.05).以SKOV3细胞PRMT5 mRNA和蛋白相对表达量最高,故选择SKOV3细胞进行后续实验.siRNA-1组与siRNA-2组PRMT5 mRNA和蛋白相对表达量均低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05).siRNA-1组与siRNA-2组1、5、10、15、20、25μmol/L DTX干预后细胞增殖抑制率均高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05).siRNA-1组与siRNA-2组在10μmol/L DTX干预时细胞增殖抑制率接近50％,故选择10μmol/L DTX进行后续实验.siRNA-1组与siRNA-2组细胞凋亡率均高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05),Ki67阳性细胞比例均低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05),而siRNA-1组与siRNA-2组、空白对照组与阴性对照组比较P均>0.05.siRNA-1组与siRNA-2组p-JAK1、p-JAK3、p-STAT6蛋白相对表达量均低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05),JAK1、JAK3、STAT6蛋白相对表达量与空白对照组和阴性对照组比较P均>0.05,并且siRNA-1组与siRNA-2组、空白对照组与阴性对照组各蛋白相对表达量比较P均>0.05.结论 敲低PRMT5可增强卵巢癌细胞对DTX的化疗敏感性,其机制可能与抑制JAK/STAT信号通路传导有关.
关键词：卵巢癌蛋白精氨酸甲基转移酶5多西紫杉醇化疗敏感性JAK/STAT信号通路
分类号：R737.31(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2022-06-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 48-53 )
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