miR-145过表达对缺氧诱导心肌细胞焦亡的抑制作用及其机制
浦湧1
崔胜宇2
吴浩亮2
陶波2
孟祥平3
夏豪2
徐林2
1.武汉经济技术开发区(汉南区)人民医院武汉大学人民医院汉南医院心内科,武汉4300902.武汉大学人民医院武汉大学心血管病研究所心血管病湖北省重点实验室心内科3.武汉市第四医院老年医学科
摘要：目的 观察miR-145过表达对缺氧诱导心肌细胞焦亡的抑制作用并探讨其机制.方法 将大鼠心肌细胞H9C2分为正常组、缺氧组、缺氧+miR-145组、缺氧+阴性对照组,缺氧+miR-145组、缺氧+阴性对照组分别使用腺病毒包装的miR-145及腺病毒包装的阴性对照序列进行腺病毒感染,正常组、缺氧组不做腺病毒感染处理;24 h后将缺氧组、缺氧+miR-145组、缺氧+阴性对照组细胞转移至缺氧培养箱中培养24 h,正常组不做缺氧诱导.采用实时荧光定量PCR法检测细胞miR-145水平,超氧化物阴离子探针检测细胞内活性氧水平,TUNEL染色及流式细胞术观察细胞焦亡情况,免疫组织化学及实时荧光定量PCR法检测细胞焦亡相关因子NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、(IL-1β)、白细胞介素1β(IL-18)水平,Western blotting法检测钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白磷酸化CaMKⅡ、磷酸化NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达.结果 心肌细胞miR-145 mRNA相对表达量缺氧+miR-145组>正常组>缺氧组、缺氧+阴性对照组,心肌细胞ROS水平缺氧组、缺氧+阴性对照组>缺氧+miR-145组>正常组,心肌细胞TUNEL阳性率及焦亡率缺氧组、缺氧+阴性对照组>缺氧+miR-145组>正常组,心肌细胞NLRP3蛋白及NLRP3、IL-1β、IL-18 mRNA表达缺氧组、缺氧+阴性对照组>缺氧+miR-145组>正常组,心肌细胞CaMKⅡ、磷酸化CaMKⅡ、NF-κB、磷酸化NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达缺氧组、缺氧+阴性对照组>缺氧+miR-145组>正常组(P均<0.05).结论 miR-145过表达可减轻缺氧诱导的心肌细胞焦亡,其机制可能与抑制CaMKⅡ/NF-κB信号通路有关.
关键词：微小RNAmiR-145心肌细胞细胞焦亡CaMKⅡ/NF-κB信号通路
分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81100130)国家自然科学基金(81370283)武汉市卫生和计划生育委员会科研项目(WX18C30)武汉市卫生和计划生育委员会科研项目(WX21Z67)
论文发表日期：2022-10-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1-6 )
英文信息