微残清颗粒含药血清对CD34+CD38-KG1a细胞增殖凋亡的影响及其作用机制
闫理想1
姜静2
杨向东1
何敬1
杨曦1
陈海静1
李德冠3
史哲新1
1.天津中医药大学第一附属医院血液科国家中医针灸临床医学研究中心,300381 天津2.天津市中医药研究院附属医院消化二科3.中国医学科学院放射医学研究所
摘要：目的 观察加入微残清颗粒含药血清对CD34+CD38-白血病干细胞(KG1a细胞)增殖、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其可能作用机制.方法 取对数生长期KG1a细胞,采用免疫磁珠法分选CD34+CD38-KG1a细胞,分为A、B、C、D组,每组5个复孔.A组用微残清颗粒含药血清(血清为终体积20％)+柔红霉素1.25μg/mL培养,B组加入微残清颗粒含药血清培养,C组加入1.25μg/mL的柔红霉素培养,D组为空白对照组,加入正常细胞培养液培养.分别于培养24、48、72 h时采用CCK8法检测各组细胞增殖情况.培养72 h时取各组细胞,采用流式细胞仪检测各组细胞周期,AUXIN-V法测算各组细胞凋亡率,测算干预Ⅰ型跨膜糖蛋白(CD95)阳性细胞比例.培养48 h时分别采用RT-PCR、WESTERN Blotting法检测各组细胞人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)及拓扑异构酶Ⅱα(TOPOⅡα)mRNA及蛋白.结果 与C、D组比较,培养24、48、72 h时A组细胞增殖抑制率高(P均<0.05).培养72 h时与C、D组比较,A、B组细胞周期G0/G1期比例下降,G2/M期比例增加(P均<0.05).与D组比较,培养72 h时A组细胞总凋亡率、早期凋亡率、晚期凋亡率高(P均<0.05);与C组比较,A、B组早期凋亡率升高,A晚期凋亡率高(P均<0.05).与B、C、D组比较,A组CD95阳性细胞比例高(P均<0.05).与C组比较,A、B组PTEN mRNA及蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与C、D组比较,A组TOPOⅡαmRNA相对表达量升高(P均<0.05);与D组比较,A组TOPOⅡα蛋白相对表达量升高(P<0.05),与C组比较,A、B组TOPOⅡα蛋白相对表达量升高(P均<0.05).结论 加入微残清颗粒含药血清与柔红霉素可抑制CD34+CD38-KG1a细胞的增殖、降低G0/G1期细胞比例、增加G2/M期细胞比例,促进细胞凋亡,其可能机制为微残清颗粒含药血清提高CD34+CD38-KG1a细胞CD95的阳性比例、促进细胞PTEN、TOPOⅡαmRNA及蛋白表达.
关键词：微残清颗粒白血病干细胞Ⅰ型跨膜糖蛋白人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因拓扑异构酶Ⅱα
分类号：R273(中医肿瘤科学)
资助基金：天津中医药大学第一附属医院拓新工程基金(2020057)天津市教委科研计划项目(2021KJ145)天津市科技计划项目(21JCQNJC01210)
论文发表日期：2022-10-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
英文信息