采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性及瞬时外向钾电流观察
何水静
徐瀚哲
胡棣文
孟宪睍
李辛一
王腾
胡丹
黄燕
武汉大学人民医院心内科武汉大学心血管病研究所心血管病湖北省重点实验室,武汉 430060;武汉大学第一临床学院
摘要：目的 通过观察采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞形态、活性及瞬时外向钾电流,以验证胶原酶Ⅱ循环灌流消化法对心肌细胞急性分离的效果.方法 利用自制Langerdorff灌流装置进行主动脉逆行灌流,胶原酶Ⅱ循环灌流消化,分离成年大鼠单个心肌细胞;利用逐步梯度复钙法选出耐钙心肌细胞;在共聚焦显微镜下观察单个心肌细胞的形态、舒缩能力,并用全细胞膜片钳记录心肌细胞瞬时外向钾电流.结果 胶原酶Ⅱ循环灌流消化法分离大鼠心肌细胞可获取90％质量良好的细胞,分离出来的心肌细胞边缘锐利、横纹清晰,折光性强,舒缩规律;复钙后仍有60％质量良好的活细胞;用全细胞膜片钳可记录到标准的瞬时外向钾电流.结论 采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性较好且耐钙,可记录到标准的瞬时外向钾电流.
关键词：心肌细胞分离术细胞急性分离术胶原酶Ⅱ循环灌流消化法心肌细胞细胞活性钾电流
分类号：R33(人体生理学)
论文发表日期：2023-01-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 17-21 )
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