泛耐药铜绿假单胞菌菌株广谱噬菌体裂解酶的获取及抗菌活性观察
王猛1
蔡大敏2
王景雨1
王策1
邵煜涵3
穆红1
1.南开大学附属天津市第一中心医院检验科,天津3001922.杭州医学院检验学院3.天津医科大学检验学院
摘要：目的 获取泛耐药铜绿假单胞菌(PA)广谱噬菌体裂解酶,并观察其抗菌活性.方法 ①取237株PA菌株,采用药敏实验筛选得到84株泛耐药PA菌株.采用噬菌斑测定法,将污水与10株泛耐药PA菌株混合培养,筛选得到9株泛耐药PA菌株噬菌体,并用84株泛耐药PA菌株,筛选出90％以上泛耐药PA菌株的广谱噬菌体.②采用Proteinase K裂解法及测序获取泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶基因、运用生物信息学工具(ORF finder和BLAST)进行序列确认,获得泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶的基因序列(目标序列),将目标序列克隆、转化、诱导纯化后得到泛耐药PA广谱噬菌体裂解酶.取泛耐药PA菌株,将其均匀涂抹至2个培养基,分别滴加5、10 μL泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶,培养24 h时观察培养基噬菌斑生长情况.结果 得到泛耐药PA菌株广谱噬菌体EPA19及EPA19裂解酶lysEPA19.5、10 μL的lysEPA19与泛耐药PA菌株混合培养后,培养基上均可见噬菌斑(5 μL LysE-PA19噬菌斑为11～13mm,10 μL LysEPA19噬菌斑为23～27 mm).结论 成功筛选得到泛耐药PA广谱噬菌体裂解酶lysEPA19,可有效抑制泛耐药PA菌株生长.
关键词：噬菌体裂解酶噬菌体铜绿假单胞菌泛耐药铜绿假单胞菌
分类号：R372(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：天津市医学重点学科(专科)建设项目(TJYXZDXK-015A)浙江省教育厅一般科研项目(00004C4Y201738494)天津市第一中心医院春风基金项目(CF201817)
论文发表日期：2023-02-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 33-37 )
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