低分子量肝素对糖尿病肾病足细胞损伤的影响及机制
王淮淮
赵学慧
王会芳
魏晓岩
贾军利
河北北方学院附属第二医院肾内科,河北张家口 075000
摘要：目的 探讨低分子量肝素(LMH)对糖尿病肾病(DN)足细胞损伤的影响及机制.方法 将人肾小球足细胞(HGPC)分为对照(NC)组、高浓度葡萄糖(HG)组、1、5、10、15、20 μmol/L LMH组,NC组细胞以含5 mmol/L葡萄糖的培养基培养;HG组细胞以含 30 mmol/L的葡萄糖培养基培养;1、5、10、15、20 μmol/L LMH组细胞以含30 mmol/L葡萄糖+不同浓度(1、5、10、15、20 μmol/L)LMH的培养基共同培养,筛选出最佳浓度15 μmol/L LMH后,又将细胞分为NC组、HG组、LMH组、BAY11-7082组、LMH+BAY11-7082组、LMH+Prostratin组.LMH组细胞以含30 mmol/L葡萄糖+15 μmol/L LMH的培养基共同培养;BAY11-7082组细胞以含30 mmol/L的葡萄糖+1 μmol/L BAY11-7082的培养基培养;LMH+BAY11-7082组细胞以含30 mmol/L葡萄糖+15 μmol/L LMH+1 μmol/L BAY11-7082的培养基培养;LMH+Prostratin组细胞以含30 mmol/L葡萄糖+15 μmol/L LMH+20 μmol/L Prostratin的培养基培养.采用活细胞计数法(CCK-8)检测HGPC细胞的细胞活力;Hoechst 33258染色法检测HGPC细胞的凋亡状况;Transwell小室实验检测HGPC细胞的侵袭能力;酶联免疫吸附实验检测HGPC裂解液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6表达;蛋白免疫印迹法检测HGPC细胞中核转录因子kappa-B(NF-κB)p65、磷酸化(p)-NF-κBp65、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达.结果 CCK-8结果显示,LMH的最适浓度为15 μmol/L.药物处理24 h后,与NC组相比,HG组细胞凋亡率、侵袭细胞数升高(P均<0.05);与HG组相比,LMH组和BAY11-7082组细胞凋亡率、侵袭细胞数下降(P均<0.05);与LMH组相比,LMH+BAY11-7082组细胞凋亡率、侵袭细胞数下降(P均<0.05),LMH+Prostratin组细胞凋亡率、侵袭细胞数升高(P均<0.05).与NC组相比,HG组TNF-α、IL-6、p-NF-κBp65、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低(P均<0.05);与HG组相比,LMH组和BAY11-7082组TNF-α、IL-6、p-NF-κBp65、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白表达下降,而E-cadherin蛋白表达上调(P均<0.05);与LMH组相比,LMH+BAY11-7082组TNF-α、IL-6、p-NF-κBp65、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白表达下降(P均<0.05),而E-cadherin蛋白表达上调(P均<0.05);LMH+Prostratin组TNF-α、IL-6、p-NF-κBp65、Vimentin、FN、N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低(P均<0.05).结论 LMH可抑制HG诱导的DN足细胞损伤,其机制可能是抑制NF-κB信号通路的活性和EMT进程.
关键词：糖尿病肾病人肾小球足细胞高糖低分子量肝素细胞凋亡NF-κB信号通路
分类号：R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：河北省医学科学研究课题(20210125)
论文发表日期：2023-08-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 41-45 )
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