沉默CCND1对肝细胞癌细胞5-氟尿嘧啶耐药性的影响及机制
阮起超1
陈松芝1
丁浩1
孙国芳2
汪杨1
1.南昌大学第二附属医院消化内科,南昌3300062.南昌大学第二附属医院心电诊断室
摘要：目的 探讨沉默细胞周期蛋白D1基因(CCND1)对肝细胞癌(HCC)细胞(SMMC-7721、HepG2细胞)5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性的影响及机制.方法 常规培养SMMC-7721、HepG2细胞,并随机分别分为HepG2+NC-siRNA组、HepG2+CCND1-siRNA组和SMMC-7721+NC-siRNA组、SMMC-7721+CCND1-siRNA组,分别用靶向CCND1的siRNA(CCND1-siRNA)、阴性对照siRNA(NC-siRNA)转染细胞.转染48 h后取各组细胞分别置于含10 μg/mL 5-Fu的培养基中培养48 h.用荧光定量PCR法检测CCND1 mRNA表达,用CCK-8实验检测细胞活力,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用Western blotting法检测CCND1、DNA修复相关蛋白[磷酸化组蛋白(γ-H2AX)、同源重组修复蛋白(RAD51)]表达.结果 转染后,HepG2+CCND1-siRNA组、SMMC-7721+CCND1-siRNA组CCND1 mRNA、蛋白表达均低于其对照组(HepG2+NC-siRNA组、SMMC-7721+NC-siRNA组),比较差异均有统计学意义(P均<0.05).5-Fu暴露下72 h,HepG2+CCND1-siRNA组、SMMC-7721+CCND1-siRNA组细胞活力(OD值)低于其对照组,凋亡率高于其对照组,γ-H2AX蛋白表达高于其对照组,RAD51蛋白表达低于其对照组,比较差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 沉默CCND1可提高HCC对5-Fu的耐药性,该作用可能与调控DNA修复相关蛋白表达有关.
关键词：肝细胞癌细胞周期蛋白D15-氟尿嘧啶磷酸化组蛋白同源重组修复蛋白
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(82060443)江西省自然科学基金资助项目(20202BAB206050)江西省卫生健康委科技计划基金资助项目(202210620)江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ2200169)江西省自然科学基金资助项目(20202BABL206010)
论文发表日期：2023-10-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 5-8 )
英文信息