茯苓酸对人骨肉瘤细胞系MG-63的增殖凋亡、迁移侵袭影响及PERK/CCAAT信号通路调控作用
施擎宇
黄帆
王冬明
上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科,上海 200032
摘要：目的 观察茯苓酸(PA)对人骨肉瘤细胞系MG-63增殖、迁移、凋亡和侵袭的影响,并探讨PA对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路的调控作用.方法 体外培养MG-63细胞,分为对照组、低浓度PA组(PA-L组)、中浓度PA组(PA-M组)、高浓度PA组(PA-H组)、高浓度PA + 蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)抑制剂GSK2606414组(PA-H + GSK2606414组),PA-L组、PA-M组及PA-H组分别用含20、40及80 μmol/L PA的培养基培养,PA-H + GSK2606414组用含80 μmol/L的PA和5 μmol/L的GSK2606414培养基培养,对照组用空白培养基培养.分别于培养24、48、72 h时采用MTT法观察各组细胞增殖情况;培养24 h时采用细胞划痕实验观察各组细胞迁移情况;培养48 h时采用Transwell实验观察各组细胞侵袭情况;培养48 h时采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率;培养48 h时,采用RT-qPCR法检测PERK及CHOP的mRNA表达,并采用WESTERN Blotting法检测PERK/CHOP信号通路相关蛋白及凋亡相关蛋白真核生物起始因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CHOP、BCL2相关X蛋白(Bax)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2).结果 与对照组比较,PA-M组及PA-H组培养48与72 h时细胞OD570nm值低、细胞迁移率低、细胞侵袭数少、细胞凋亡率高(P均<0.05);与PA-M组相比,PA-H组培养48及72 h时的细胞OD570nm值低、细胞迁移率低、细胞侵袭数少、细胞凋亡率高(P均<0.05);与PA-H组相比,PA-H + GSK2606414组细胞培养48及72 h时的OD570nm值高、细胞迁移率高、细胞侵袭数多、细胞凋亡率低(P均<0.05).与对照组比较,PA-M组及PA-H组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量高,PERK及eIF2α磷酸化水平高,ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量高,Bcl-2 相对表达量低(P均<0.05);与PA-M组相比,PA-H组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量高,PERK及eIF2α磷酸化水平高,ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量高,Bcl-2相对表达量低(P均<0.05);与PA-H组相比,PA-H + GSK2606414组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量低,PERK及eIF2α磷酸化水平低,ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量低,Bcl-2相对表达量高(P均<0.05).结论 PA可抑制MG-63细胞的增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡.PA可能通过激活PERK/CHOP信号通路,抑制MG-63细胞的增殖迁移及侵袭,促进MG-63细胞的凋亡.
关键词：茯苓酸骨肉瘤细胞增殖细胞凋亡细胞侵袭蛋白激酶R样内质网激酶CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白
分类号：R285(中药学)
论文发表日期：2023-10-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
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