吡咯啉-5-羧酸合成酶在人肝癌组织中表达及其对人肝癌细胞系铁死亡的调控作用观察
张玉衡
陈鸣
曹科
王刚
朱章华
虞文魁
南京大学医学院附属鼓楼医院重症医学科,南京 210009
摘要：目的 观察吡咯啉-5-羧酸合成酶(Pyrroline-5-carboxylate synthase,P5CS)在肝细胞癌(Hepatocellular car-cinoma,HCC)组织中的表达变化及其对人肝癌细胞系铁死亡的调控作用.方法 ①HCC及癌旁组织P5CS检测:选择10例HCC患者的癌组织及癌旁组织,采用免疫组化法检测HCC及癌旁组织P5CS蛋白;②P5CS对人肝癌细胞系Li-7、Huh-7铁死亡的调控作用观察:取对数生长期Li-7、Huh-7,用siALDH18A1[乙醛脱氢酶家族18成员A1(AL-DH18A1)可编码P5CS蛋白]转染细胞,采用qRT-PCR法检测转染前后Li-7及Huh-7细胞脂质过氧化物合成相关基因ACSL4、LPCAT3、LOX-15,采用WESTERN Blotting法检测转染前后Li-7及Huh-7细胞铁死亡相关蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4).取转染前后Li-7及Huh-7细胞各分为2组,分别加入5 μmol/L的铁死亡诱导剂Erastin、同体积DMSO,采用C11-BODIPY荧光探针检测各组细胞脂质过氧化物含量.取转染前、后Li-7及Huh-7细胞各分为2组,分别加入5 μmol/L的GPX4靶向抑制剂RSL-3、5 μmol/L的Erastin、同体积DMSO,采用C11-BODIPY荧光探针检测各组细胞脂质过氧化物含量.结果 HCC及癌旁组织P5CS蛋白相对表达量分别为6.80±2.10、0.40±0.20,二者比较,P<0.05.与转染前比较,转染后Li-7及Huh-7细胞SLC7A11、GPX4蛋白相对表达量低(P均<0.05).与转染前比较,转染后加入Erastin、RSL-3的Li-7、Huh-7 细胞脂质过氧化物含量均升高(P均<0.05).与加入Erastin者比较,转染后加入RSL-3的Li-7、Huh-7 细胞脂质过氧化物含量高、细胞活性低(P均<0.05).结论 HCC组织中P5CS表达升高.P5CS可抑制Li-7及Huh-7细胞的铁死亡,P5CS可能通过抑制细胞GPX4表达,调控Li-7及Huh-7细胞的铁死亡.
关键词：吡咯啉-5-羧酸合成酶铁死亡谷胱甘肽过氧化物酶4肝肿瘤肝细胞癌
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：国家重大科研仪器研制项目(81927808)国家自然科学基金(82002082)
论文发表日期：2023-10-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 11-15 )
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