微小RNA-21对脓毒症小鼠急性肺损伤的改善作用及其机制
葛晨1
何聪1
刘俊行2
付优1
贾丽静1
龙玲1
杜全胜1
1.河北省人民医院重症医学科,石家庄 0500002.河北省儿童医院骨科
摘要：目的 观察微小RNA-21(miR-21)对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)的改善作用,并探讨其可能作用机制.方法 40只雄性昆明小鼠随机分为miR-21前体 + ALI组(Pre-miR-21 + ALI组)、miR-21前体 + 磷脂酰肌醇3 激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)抑制剂LY294002 + ALI组(Pre-miR-21 + LY + ALI组)、PI3K/Akt抑制剂LY294002 + ALI组(LY + ALI组)、ALI组、假手术组,每组各8只.ALI组小鼠采用盲肠结扎穿孔术(CLP)造成脓毒症ALI;Pre-miR-21 + ALI组小鼠先尾静脉注射miR-21 前体腺病毒 0.2 mL(1×109pfu/mL),4天后采用CLP造成脓毒症ALI;Pre-miR-21 + LY + ALI组小鼠先尾静脉注射miR-21前体腺病毒0.2ml(1×109pfu/mL),4天后尾静脉注射LY(0.3 mg/g),注射30 min后进行CLP;LY + ALI组小鼠先尾静脉注射LY(0.3 mg/g),注射30 min后进行CLP;假手术组小鼠仅开腹探查盲肠.干预24 h时麻醉各组小鼠后取腹主动脉血,测算各组小鼠氧合指数(OI),采用ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-6和氧化应激指标ROS、SOD;处死各组小鼠后取右肺组织,HE染色观察肺组织病理学变化,测算肺组织肺湿重/干重比值(W/D);取各组小鼠左肺组织,采用qRT-PCR法检测miR-21,采用WESTERN Blotting法检测各组小鼠左肺组织磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白.结果 与假手术组比较,ALI组小鼠OI下降,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D、miR-21表达升高(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血,PTEN蛋白相对表达量下降,p-Akt蛋白相对表达量增加(P均<0.05);与ALI组比较,Pre-miR-21 + ALI组小鼠OI高,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D降低,miR-21相对表达量高(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血减轻,PTEN蛋白相对表达量下降,p-Akt蛋白相对表达量增加(P均<0.05);与ALI组比较,Pre-miR-21 + LY + ALI组OI降低,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D、miR-21相对表达量升高(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血加重,PTEN蛋白相对表达量下降,p-Akt蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与ALI组比较,LY + ALI组OI降低,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D升高(P均<0.05),肺泡结构破坏、肺泡出血加重;与Pre-miR-21 + LY + ALI组比较,LY + ALI组OI降低,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D升高,miR-21相对表达量下降(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血加重,PTEN蛋白相对表达量升高,p-Akt蛋白相对表达量下降(P均<0.05).结论 尾静脉预注射miR-21前体腺病毒的脓毒症小鼠急性肺损伤程度较轻,肺组织PTEN蛋白相对表达量低、p-Akt蛋白相对表达量高.miR-21可能通过抑制肺组织PTEN表达、促进p-Akt表达,减轻脓毒症小鼠肺组织炎症反应和氧化应激水平,从而减轻脓毒症小鼠ALI.
关键词：微小RNA微小RNA-21脓毒症急性肺损伤磷脂酶和张力蛋白同源物丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶
分类号：R392.3(医学免疫学)
资助基金：河北省医学科学研究重点课题(20180192)河北省医学科学研究课题(20220870)
论文发表日期：2023-10-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 49-53 )
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