HYOU1对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响及其机制
周晨明1
薛岩2
孟丽1
朱艳1
徐彦楠3
1.河北医科大学大型科研仪器设备共享服务平台,石家庄 0500172.河北医科大学第二医院神经内科3.河北医科大学教学实验中心
摘要：目的 观察内质网分子伴侣复合物缺氧上调基因1(HYOU1)对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响,并基于ROS/PI3K/AKT通路探讨相关机制.方法 培养RSC96细胞,构建HYOU1重组表达质粒,采用随机数字表法将细胞分为高糖组、高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组,三组均以高糖培养,其中高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组分别转染对照质粒和pEGFP-HYOU1质粒.采用Western blotting法检测各组细胞中的自噬相关蛋白(LC3、ATG5、ATG12、Beclin1、p62)、JAK/STAT通路相关蛋白(JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6)、ROS/PI3K/AKT通路相关蛋白(PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR),采用流式细胞术测算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2,采用DCFH-DA染色检测各组ROS水平.结果 高糖+HYOU1质粒组LC3、ATG5、ATG12、Beclin1蛋白表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,p62蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05).高糖+HYOU1质粒组凋亡率、Bax mRNA表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,Bcl-2 mRNA表达及JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05).高糖+HYOU1质粒组PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组,ROS水平低于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05).结论 HYOU1过表达可下调高糖环境施万细胞的自噬和凋亡,作用机制可能与调控ROS/PI3K/AKT通路有关.
关键词：HYOU1基因施万细胞细胞自噬细胞凋亡ROS/PI3K/AKT通路糖尿病糖尿病周围神经病
分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：河北省医学科学研究课题计划项目(20220974)
论文发表日期：2023-11-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 6-10 )
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