miR-381在HCC患者肿瘤组织、外周血中表达及过表达对巨噬细胞极化模式调节作用
吴书志1
王菁2
1.山东省疾病预防控制中心,济南 2500132.山东第一医科大学附属中心医院医学实验诊断中心
摘要：目的 观察miR-381在肝细胞癌(HCC)患者肿瘤组织、外周血和体外培养巨噬细胞中的表达变化,并探讨miR-381过表达对巨噬细胞极化模式的调节作用.方法 HCC患者40例,术中留取肿瘤组织与癌旁组织,采用RT-PCR法检测miR-381、一氧化氮合酶(iNOS,M1型巨噬细胞标记物)mRNA、精氨酸酶1(Arg-1,M2型巨噬细胞标记物)mRNA,采用Western Blotting法检测iNOS、Arg-1蛋白.抽取HCC患者和健康志愿者外周静脉血,采用RT-PCR法检测miR-381、CD86(M1型巨噬细胞标记物)mRNA、CD163(M2型巨噬细胞标记物)mRNA,采用流式细胞法检测CD86、CD163蛋白.取人髓系白血病单核细胞THP-1,分别诱导分化成M0型巨噬细胞(M0组)、M2型巨噬细胞(M2组)、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs,CM组),采用RT-PCR法检测各组细胞miR-381、iNOS mRNA、Arg-1 mRNA、CD86 mRNA、CD163 mRNA,采用Western Blotting法和流式细胞法检测iNOS、Arg-1、CD86、CD163蛋白.取M0型巨噬细胞,分别转染miR-381模拟物(miR-381 mimic)、对照模拟物(mimic NC),记为miR-381 mimic组、mimic NC组,建立miR-381 过表达细胞模型,采用RT-PCR法检测各组细胞miR-381、iNOS mRNA、Arg-1 mRNA、CD86 mRNA、CD163 mRNA,采用Western Blotting法和流式细胞法检测iNOS、Arg-1、CD86、CD163蛋白.结果 HCC患者肿瘤组织中miR-381、iNOS mRNA和蛋白相对表达量低于癌旁组织,Arg-1 mRNA和蛋白相对表达量高于癌旁组织(P均<0.05).HCC患者外周血巨噬细胞中miR-381、CD86 mRNA和蛋白表达水平低于健康志愿者,CD163 mRNA和蛋白表达水平高于健康志愿者(P均<0.05).CM组巨噬细胞中miR-381、iNOS mRNA、Arg-1 mRNA、CD86 mRNA、CD163 mRNA和蛋白相对表达量介于M0组、M2组之间(P均<0.05).miR-381 mimic组巨噬细胞中miR-381、iN-OS mRNA、CD86 mRNA和蛋白表达水平均升高,而Arg-1 mRNA、CD163 mRNA和蛋白表达水平均降低(P均<0.05).结论 miR-381在HCC患者肿瘤组织、外周血和体外培养巨噬细胞中均呈低表达,过表达miR-381可以使巨噬细胞由M2型极化转化为M1型极化.
关键词：肝细胞癌miR-381巨噬细胞肿瘤相关巨噬细胞M1型巨噬细胞M2型巨噬细胞
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：济南市科技计划项目(202019046)济南市卫生健康委员会科技计划项目(2020-4-20)
论文发表日期：2023-11-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1-6 )
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