不同复温时点的热打击人骨骼肌细胞损伤情况观察及其机制
刘斌1
袁芳芳2
豆春丽3
肖宝4
李霖4
李慧3
苏磊3
1.中南大学湘雅医学院附属长沙医院 长沙市第一医院急诊科,长沙 410005;南部战区总医院重症医学科2.中南大学湘雅三医院血液科3.南部战区总医院重症医学科4.中南大学湘雅医学院附属长沙医院 长沙市第一医院急诊科,长沙 410005
摘要：目的 观察不同复温时点的热打击人骨骼肌细胞(HSKMC)损伤情况,并探讨其可能的机制.方法 将对数生长期的HSKMC分为热打击组和对照组,对照组正常培养,热打击组建立热打击细胞损伤模型后置于37℃、5%CO2细胞培养箱中复温,复温时间分别为0、6、12、24 h.采用CCK-8法检测细胞存活率,透射电镜下观察细胞超微结构,Western blotting法检测瞬时感受器电位香草酸受体亚型4(TRPV4)蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测TRPV4 mRNA相对表达量.将对数生长期的HSKMC分为HS组、GSK+HS组、HC+HS组和NC组,NC组正常培养,其他三组建立热打击细胞损伤模型,复温时间均为12 h,GSK+HS组、HC+HS组在热打击前0.5 h分别给予TRPV4激动剂GSK1016790A 500 nmol、TRPV4抑制剂HC-0670475 μmol,采用流式细胞术检测细胞内Ca2+浓度.结果 与对照组比较,复温0、6、12、24 h的热打击组细胞存活率均降低(P均＜0.05);随着复温时间的延长,热打击组细胞存活率依次降低,两两比较P均＜0.05.与对照组比较,复温0、6 h的热打击组细胞即可出现超微结构改变,主要表现为细胞肿胀、体积变大,细胞质空泡化,线粒体明显肿胀、脱颗粒、双嵴消失,细胞核周间隙增宽,细胞核凝聚、固缩,部分包膜连续性中断;复温12、24 h的热打击组细胞出现核仁溶解消失,细胞核碎裂、染色质边集,细胞质结构崩解、呈颗粒状.与对照组比较,复温0、6、12、24 h的热打击组细胞TRPV4 mRNA及蛋白相对表达量均升高(P均＜0.05).NC组、HC+HS组、HS组、GSK+HS组细胞内Ca2+浓度依次升高,组间两两比较P均＜0.05.结论 热打击会造成HSKMC存活率降低及结构损伤,热打击后复温时间越长对细胞的损伤越大,其机制可能与促进TRPV4表达及其介导的Ca2+内流有关.
关键词：瞬时感受器电位香草酸受体亚型4热打击复温钙离子横纹肌溶解中暑
分类号：R594.1(全身性疾病)
资助基金：湖南省卫健委科研项目(202110000190)睿E(睿意)急诊医学研究专项基金(R2020009)
论文发表日期：2023-12-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 15-18 )
英文信息