人OC细胞系细胞miR-211-5p表达、转染miR-211-5p模拟物后的增殖及迁移侵袭和EMT观察
杨立芬1
何建清1
尹立新2
1.唐山市妇幼保健院妇产科,河北唐山 0630002.唐山市南湖医院外科
摘要：目的 观察人卵巢癌(OC)细胞系细胞微小RNA-211-5p(miR-211-5p)表达、转染miR-211-5p模拟物(miR-211-5p mimics)后的增殖及迁移侵袭和上皮间质转化(EMT).方法 体外培养人OC细胞系(SKOV3、A2780、HO8910细胞)及人正常卵巢上皮IOSE80细胞,采用qRT-PCR法检测上述细胞miR-211-5p.取对数生长期的SKOV3细胞,并随机分为两组,高表达组转染miR-211-5p mimics,对照组转染miR-NC,采用CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验、Western blotting法分别测算两组细胞OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、EMT相关蛋白及壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)蛋白灰度值比值.将miR-211-5p mimics或miR-NC与CHI3L1野生型双荧光素酶报告载体CHI3L1-wt或CHI3L1突变型双荧光素酶报告载体CHI3L1-mut共转染入SKOV3细胞中,分为记为miR-211-5p mimics + CHI3L1-wt组、miR-NC + CHI3L1-wt组、miR-211-5p mimics + CHI3L1-mut组、miR-NC + CHI3L1-mut组,转染24 h后收集并裂解细胞,应用荧光素酶试剂盒检测各组细胞的荧光素酶活性.结果 与IOSE80细胞比较,SKOV3、A2780、HO8910细胞miR-211-5p相对表达量降低(P均＜0.05).与对照组比较,高表达组OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、N-Cadherin和Fibronectin蛋白灰度值比值降低,E-Cadherin蛋白灰度值比值升高(P均＜0.05).与对照组比较,高表达组CHI3L1蛋白灰度值比值降低(P＜0.05).与miR-NC + CHI3L1-wt组比较,miR-211-5p mimics + CHI3L1-wt组细胞相对荧光素酶活性降低(P＜0.05).结论 miR-211-5p在OC各细胞系中表达降低;转染miR-211-5p mimics可抑制SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及EMT,机制是通过负向调控CHI3L1表达实现的.
关键词：微小核糖核酸-211-5p卵巢癌SKOV3细胞细胞增殖细胞迁移细胞侵袭细胞上皮间质转化壳多糖酶3样蛋白1
分类号：R737.31(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：河北省医学科学研究课题(20191534)
论文发表日期：2023-12-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 5-9 )
英文信息