受体酪氨酸激酶Mer对高糖环境培养的大鼠雪旺细胞系RSC96增殖调控作用观察
付怡丹1
陈文婷1
苏晓杨2
赵燕3
兰丹凤4
杨秋萍5
1.昆明医科大学第一附属医院干部医疗科,昆明 6500322.昆明医科大学第一附属医院重症医学科3.昆明医科大学第一附属医院糖尿病科4.云南省第一人民医院消化内科5.昆明医科大学第一附属医院内分泌一科
摘要：目的 观察受体酪氨酸激酶Mer(MER tyrosine kinase,Mertk)在高糖环境培养条件下的大鼠雪旺细胞系RSC96增殖的调控作用.方法 取RSC96分为一、二、三、四、五组,分别置于含25(正常葡萄糖浓度)、50、75、100及125 mmol/L葡萄糖的培养基中培养,培养48 h时采用Western Blotting法检测各组细胞Mertk,筛选Mertk蛋白相对表达量最高浓度为后续研究的高糖浓度.取RSC96细胞先饥饿处理4 h,置入含100 mmol/L的葡萄糖培养基中,分别于培养0、24、36、48、60 h时取各组细胞,采用Western Blotting法检测各组细胞Mertk,最终筛选Mertk蛋白相对表达量高的时间为后续研究培养时间.取RSC96细胞,分为对照组、高糖组、高糖敲降组及敲降组:高糖组细胞饥饿处理4 h,置于含100 mmol/L葡萄糖的培养基中培养;高糖敲降组细胞饥饿处理4 h,置于含100 mmol/L葡萄糖的培养基中,后加入5 µL的敲降Mertk基因表达siRNA溶液;敲降组细胞饥饿处理4 h,加入5 µL的敲降Mertk基因表达siRNA溶液;对照组细胞用正常培养基培养.培养48 h时取各组细胞,采用Edu法测算各组细胞增殖活力,采用Western Blotting法检测各组细胞Mertk、磷酸化核转录因子κB、P65及肿瘤坏死因子α(TNF-α).结果 与一组相比,四、五组细胞Mertk蛋白相对表达量高(P均<0.05);与培养0 h相比,培养48、60 h时RSC96细胞Mertk相对表达量高(P均<0.05).与对照组相比,高糖组细胞增殖活力低(P<0.05),敲降组细胞增殖活力高(P<0.05);与对照组相比,高糖敲降组细胞P65、TNF-α相对表达量高(P均<0.05),敲降组细胞Mertk相对表达量低、P65及TNF-α相对表达量高(P均<0.05),高糖组细胞Mertk、P65及TNF-α相对表达量高(P均<0.05).结论 敲降Mertk基因表达的高糖环境培养RSC96细胞的增殖能力高,细胞P65、TNF-α表达高.Mertk可能通过促进细胞P65、TNF-α表达,促进高糖环境培养RSC96细胞的增殖.
关键词：受体酪氨酸激酶受体酪氨酸激酶Mer葡萄糖雪旺细胞细胞增殖核转录因子κBP65基因肿瘤坏死因子α
分类号：R587.11(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：云南省科技厅科技计划项目(202001AY070001-159)
论文发表日期：2024-02-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 29-33 )
英文信息