微小RNA-125a-5p对人鼻咽癌细胞增殖的影响及机制
万芳竹1
张浩炯1
张宗璞2
1.上海市质子重离子医院放疗科 复旦大学附属肿瘤医院放疗科,上海 201321;上海市放射肿瘤学重点实验室;上海质子重离子放射治疗工程技术研究中心2.复旦大学附属华山医院神经外科
摘要：目的 探究微小RNA-125a-5p(miR-125a)对人鼻咽癌细胞(HK-1细胞)增殖的影响及机制.方法 常规培养HK-1细胞及人胚肾细胞永生化细胞系(293T细胞),将HK-1细胞随机分为对照1组、过表达miR-125a组(转染miR-125a mimics)、沉默miR-125a组(转染miR-125a inhibitor);另取部分HK-1细胞随机分为对照2组、miR-125a过表达组(转染miR-125a mimics)及回补组[转染miR-125a mimics同时过表达含PDZ结合基序的转录共激活因子(TAZ)].转染48 h后检测miR-125a表达验证转染效率.用RT-qPCR法检测miR-125a-5p、TAZ mRNA;用Western blotting法检测TAZ蛋白;CCK-8实验、集落形成实验检测细胞增殖能力;通过预测网站TargetScan( 对照1组、过表达miR-125a组、沉默miR-125a组miR-125a的相对表达量比较差异有统计学意义(P均<0.05).对照1组、过表达miR-125a组、沉默miR-125a组转染后第2、3、4、5、6天增殖活力(OD450值)比较差异均有统计学意义(P均<0.05)、集落形成数比较差异有统计学意义(P均<0.05).对照1组、过表达miR-125a组、沉默miR-125a组TAZ蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(P均<0.05).网站预测显示miR-125a与TAZ存在结合位点,设计突变型序列(TAZ-3'UTR MT),miR-125a与TAZ的非编码区结合,miR-125a的直接下游靶点为TAZ.WT+miR-125a组相对荧光强度低于WT+miR-ctrl组、Mut+miR-ctrl组(P均<0.05),Mut+miR-125a组相对荧光强度与WT+miR-ctrl组、Mut+miR-ctrl组比较差异无统计学意义(P均>0.05).对照2组、miR-125a mimics组、miR-125a mimics+TAZ组转染后第2、3、4、5、6天增殖活力比较差异有统计学意义(P均<0.05),集落形成数比较差异有统计学意义(P均<0.05).结论 miR-125a可抑制鼻咽癌细胞增殖,其作用机制与抑制其下游靶点TAZ的表达有关.
关键词：鼻咽癌微小RNA-125a含PDZ结合基序的转录共激活因子细胞增殖
分类号：R739.6(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(82103059)
论文发表日期：2024-03-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 12-16 )
英文信息