二氢杨梅素对LPS/ATP诱导血管内皮细胞NLRP3炎症小体活化的影响及机制
乔秀梅
厉彦翔
薛彩彩
陈心茹
袁浩铭
王金红
山东第二医科大学药学院,山东潍坊 261053
摘要：目的 探讨二氢杨梅素(DHM)对脂多糖(LPS)/三磷酸腺苷(ATP)诱导的血管内皮细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,将细胞随机分为空白对照组、LPS/ATP组、LPS/ATP+25 µmol/L DHM组、LPS/ATP+50 µmol/L DHM组和LPS/ATP+100 µmol/L DHM组.除空白对照组外,其他各组经LPS(0.5 µg/mL)诱导细胞3.5 h后加入ATP(5 mmol/L)处理细胞30 min;DHM各组分别加入25、50、100 µmol/L DHM孵育1 h后加入LPS/ATP诱导.用Western blotting法检测NLRP3、ASC、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1前体蛋白(pro-caspase-1)、剪切体半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(cleaved caspase-1)、沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白;用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)对SIRT1进行富集分析,用转录调控网络分析SIRT1调控的靶基因并构建网络图;用免疫荧光法进行SIRT1定位检测;分子对接分析DHM与SIRT1的作用模式.结果 与空白对照组比较,LPS/ATP组NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白表达高(P均<0.05);与LPS/ATP组比较,各DHM组NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白表达低(P均<0.05).SIRT1主要分布于细胞核内.与空白对照组比较,LPS/ATP组相对荧光强度弱(P<0.05);与LPS/ATP组比较,LPS/ATP+100 µmol/L DHM组相对荧光强度强(P<0.05).与空白对照组比较,LPS/ATP组SIRT1蛋白表达低(P<0.05);与LPS/ATP组、LPS/ATP+25 µmol/L DHM组比较,LPS/ATP+50 µmol/L DHM组、LPS/ATP+100 µmol/L DHM组SIRT1蛋白表达高(P均<0.05).GO富集分析结果:生物过程富集分析结果显示与对营养水平的反应等生物过程联系密切;细胞组分富集分析结果显示与染色质沉默复合体等密切相关;分子功能富集分析结果显示与染色质DNA结合等分子功能有关.KEGG通路富集分析结果:SIRT1涉及长寿调节、脂质与动脉粥样硬化等信号通路.DHM可有效嵌入SIRT1(受体生物大分子)的"活性口袋".结论 DHM可抑制LPS/ATP诱导的血管内皮细胞NLRP3炎症小体活化,其机制可能与上调SIRT1表达有关.
关键词：二氢杨梅素动脉粥样硬化核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体血管内皮细胞沉默信息调节因子1
分类号：R972.6(药品)
资助基金：国家自然科学基金(82100489)山东省自然科学基金资助项目(ZR2021QH095)潍坊医学院公派国内访学项目(20227-07)
论文发表日期：2024-03-05
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 17-21 )
英文信息