miR-9-5p对肺腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力的调控作用及其机制
赵宝山
孙光蕊
黄景涛
侯继申
梁宗英
承德医学院附属医院胸外科,河北承德 067000
摘要:目的 观察微小RNA(miR)-9-5p对肺腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力的调控作用,并基于痉挛性截瘫20(SPG20)基因及Notch信号通路探讨相关机制.方法 培养肺腺癌细胞株A549并分为抑制物组、阴性对照组和未转染组,抑制物组和阴性对照组分别转染miR-9-5p抑制物和阴性对照,未转染组不进行转染;采用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Western blotting法检测Notch信号通路相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Notch1、Snail和基质金属蛋白酶2(MMP-2)].采用TargetScan( mRNA和蛋白;将A549细胞分为抑制物组、阴性对照组和未转染组,采用RT-PCR法检测各组细胞中的SPG20 mRNA.结果 培养12、24、36、48 h时miR-9-5p抑制物组细胞增殖能力低于阴性对照组和未转染组(P均<0.05).抑制物组穿模细胞数和细胞迁移距离低于阴性对照组和为转染组(P均<0.05).抑制物组Notch1、Snail、MMP-2蛋白表达低于阴性对照组和未转染组,E-cadherin蛋白表达高于阴性对照组和未转染组(P均<0.05).SPG20基因存在连续的可以与miR-9-5p互补的核苷酸序列;共转染SPG20-WT和miR-9-5p质粒的A549细胞相对荧光素酶活性低于其他细胞(P均<0.05).肺腺癌组织和细胞中miR-9-5p高表达、SPG20 mRNA和蛋白低表达(P均<0.05),肺腺癌组织中miR-9-5p与SPG20 mRNA表达呈负相关(r=-0.914,P<0.05).抑制物组SPG20 mRNA表达高于阴性对照组和未转染组(P均<0.05).结论 miR-9-5p能够抑制肺腺癌细胞的增殖能力及侵袭、迁移能力,作用机制可能与负性调节SPG20基因表达及调控Notch信号通路有关.
关键词:微小RNA-9-5pSPG20基因肺腺癌Notch信号通路
分类号:R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金:河北省自然科学基金(H2021406045)河北省承德市科学技术研究与发展计划项目(201904A029)
论文发表日期:2024-03-15
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 19-23 )
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