美洲大蠊提取物PAS840的乙酰胆碱酯酶活性抑制作用及抗氧化能力观察
管堂飞
杨鑫
洪灿辉
肖培云
张成桂
何正春
大理大学药学院 云南省昆虫生物医药研发重点实验室,云南大理 671000
摘要：目的 探讨美洲大蠊提取物PAS840的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性和抗氧化活性.方法 根据预实验确定最佳酶促反应条件得到的数据,AChE浓度为0.425 U/mL、底物碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)浓度为15 mmol/L、反应时间为20 min,采用改良的Ellman法进行酶促反应,检测不同浓度(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250 µg/mL)PAS840对AChE催化ATCI分解的抑制率,计算其半数抑制浓度(IC50),采用米氏方程相关的酶动力学实验测定PAS840对AChE的抑制类型.取不同浓度的PAS840溶液或维生素C(VC),采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法检测其对DPPH自由基的清除率,采用总还原能力测定法检测其对铁氰化钾的还原率,采用水杨酸法检测其对羟自由基的清除率,并计算相关的IC50.结果 PAS840对AChE催化反应进程具有抑制作用,且随着PAS840作用浓度增加和时间延长,其抑制作用更为明显;随着PAS840作用浓度增加,AChE抑制率先逐渐升高再趋于平缓.PAS840抑制AChE催化ATCI分解的IC50为22.30 µg/mL,其抑制类型是混合性抑制.随着浓度的增加,PAS840、Vc对DPPH自由基的清除率均呈先升高后平稳的趋势;500 µg/mL PAS840对DPPH自由基的清除率为93.95%,同等浓度Vc的清除率为97.31%;PAS840清除DPPH自由基的IC50为43.21 µg/mL.随着浓度的增加,PAS840对铁氰化钾的还原率呈先升高后平稳的趋势,Vc对铁氰化钾的还原率呈比较高的平稳趋势;3.0 mg/mL PAS840对铁氰化钾的还原率为93.95%,同等浓度Vc的还原率为82.2%;PAS840还原铁氰化钾的IC50为0.498 mg/mL.随着浓度的增加,PAS840对羟自由基的清除率呈比较中等的平稳趋势,Vc对羟自由基的清除率呈逐渐升高趋势;1.8 mg/mL PAS840对羟自由基的清除率为45.72%,其后逐渐趋于平缓,同等浓度Vc的清除率为74.06%;3.0 mg/mL PAS840对羟自由基的清除率为47.83%,同等浓度Vc的清除率为89.73%;PAS840清除羟自由基的IC50 为3.65 mg/mL.结论 PAS840具有较强的AChE活性抑制作用和抗氧化能力.
关键词：PAS840美洲大蠊乙酰胆碱酯酶神经退行性疾病氧化应激
分类号：R285(中药学)
资助基金：国家自然科学基金(82060747)
论文发表日期：2024-04-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
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