人小胶质细胞中促甲状腺激素受体的表达、分布及活性观察
陈雪兰
傅士恩
匡雅琪
朱莹丽
黄振兴
杨海燕
罗佐杰
广西医科大学第一附属医院内分泌科,南宁 530021
摘要:目的 探讨人小胶质细胞(HMC3)中促甲状腺激素受体(TSHR)的表达、分布及活性.方法 取人小胶质细胞HMC3,以人甲状腺细胞及肝细胞作为对照,采用逆转录聚合酶链式反应检测TSHRN mRNA表达,以验证TSHR mRNA转录物.通过Western blotting法和免疫荧光染色分析测定HMC3细胞中TSHR蛋白水平及分布.将HMC3细胞分为0、20、50、100、200 ng/mL促甲状腺激素受体刺激抗体(TSAb)组和阴性对照组,将各组细胞加入100 μmol/L磷酸二酯酶抑制剂IBMX预孵育60 min,然后向TSAb组分别加入相应浓度的TSHR特异性抗体TSAb培养24 h.使用免疫测定试剂盒测定各组环磷酸腺苷(cAMP)水平,验证TSHR在HMC3细胞中的活性.结果 在HMC3细胞中检测到TSHR mRNA,其序列与人甲状腺细胞及肝细胞来源的mRNA相同.TSHR蛋白在HMC3细胞的细胞膜中表达.与0 ng/mL TSAb组相比,20 ng/mL TSAb组cAMP水平无统计学差异,50、100、200 ng/mL TSAb组cAMP水平增加,且高浓度组cAMP水平高于低浓度组(P<0.05或<0.01).结论 TSHR在人小胶质细胞中存在并表达于细胞膜,且具有信号传导功能.
关键词:促甲状腺激素受体小胶质细胞促甲状腺激素受体刺激抗体环磷酸腺苷
分类号:R581(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金:国家自然科学基金(82260159)
论文发表日期:2024-05-15
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 18-21 )
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山东医药

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ISSN:1002-266X
年,卷(期):2024,64(14)
所属栏目:论著