miR-216a和CAPN6基因过表达人宫颈癌细胞系HeLa增殖迁移侵袭变化及靶向关系
张贤雨
马欢
宋凤丽
刘晓玉
李植燕
原娜
郝晓慧
张志林
河北北方学院附属第一医院放疗科,河北张家口 075000
摘要：目的 观察微小RNA-216a(miR-216a)和钙蛋白酶6(CAPN6)基因过表达的人宫颈癌细胞系HeLa增殖、迁移、侵袭变化及靶向关系,探讨miR-216a对HeLa细胞增殖迁移侵袭影响的作用机制.方法 取对数生长期HeLa细胞,分为一、二、三、四、五组,一组转染miR-216a mimic,二组转染pcDNA3.1-CAPN6质粒,三组顺序转染miR-216a mimic、pcDNA3.1-CAPN6,四组转染pcDNA3.1,五组转染miR-216a mimic NC,培养48 h时分别采用CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell试验观察各组细胞的增殖迁移侵袭情况,培养24 h时采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-216a、采用Western Blotting法检测各组细胞CAPN6及信号转导子与激活子3(STAT3)蛋白.取对数生长期HeLa细胞分为四组:A组细胞顺序转染miR-216a mimic、pGL3-CAPN6-WT质粒,B组细胞顺序转染miR-216a mimic、pGL3-CAPN6-MUT质粒,C组细胞顺序转染miR-216a mimic NC、pGL3-CAPN6-WT,D组细胞顺序转染miR-216a mimic NC、pGL3-CAPN6-MUT,培养36 h时收集各组细胞,采用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测算各组细胞相对荧光素酶活性.结果 与五组相比,培养48 h时一组细胞增殖活性及划痕前缘迁移距离百分比低、侵袭细胞数少(P均<0.01);与四组相比,二组细胞增殖活性及划痕前缘迁移距离百分比高、侵袭细胞数多(P均<0.01);与一组相比,三组细胞增殖活性及划痕前缘迁移距离百分比高、侵袭细胞数多(P均<0.01);与二组相比,三组细胞增殖活性及划痕前缘迁移距离百分比低、侵袭细胞数少(P均<0.01).与五组相比,一组细胞miR-216a相对表达量高(P<0.01).与四组相比,培养24 h时二组细胞CAPN6蛋白、p-STAT3/STAT3相对表达量高,三组细胞表达CAPN6蛋白、p-STAT3/STAT3相对表达量低;与五组相比,一组细胞CAPN6蛋白、p-STAT3/STAT3相对表达量低;与一组相比,三组细胞CAPN6蛋白、p-STAT3/STAT3相对表达量高.与B组相比,A组细胞荧光素酶活性低(P<0.05).结论 miR-216a过表达可抑制HeLa细胞的增殖侵袭和迁移.HeLa细胞中 miR-216a与CAPN6基因存在靶向关系.miR-216a可能通过调控CAPN6基因表达,抑制HeLa的增殖、迁移及侵袭.
关键词：微小RNA微小RNA-216a钙蛋白酶6细胞增殖细胞侵袭细胞迁移宫颈癌
分类号：R737(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：河北省医学科学研究重点课题(20220594)张家口市科技计划自筹项目(2121192H)
论文发表日期：2024-06-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 21-25 )
英文信息