血根碱对膀胱癌T24细胞增殖迁移的调控作用及其机制
潘登1
许浩1
马雨阳1
王靖凯2
王海跞3
徐鹏2
庞昆3
陈波1
1.蚌埠医科大学研究生院,安徽蚌埠 233030;徐州市中心医院泌尿外科2.江苏大学研究生院3.徐州市中心医院泌尿外科
摘要：目的 观察血根碱对膀胱癌T24细胞增殖迁移的调控作用,并探索可能的作用靶基因及作用机制.方法 培养膀胱癌T24细胞和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,分别分为实验组和对照组,实验组分别加入0.012 5、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 μmol/L的血根碱,对照组培养基中不加血根碱,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力,并计算半数抑制浓度(IC50).将T24细胞分为实验组和对照组,实验组给予血根碱,对照组不进行血根碱处理,采用Transwell小室实验检测细胞迁移能力.分别基于BATMAN、SwissTargetPrediction网络药理学数据库、TCGA数据库分析并筛选得到血根碱作用靶基因和膀胱癌治疗靶基因的交集靶基因,进行GO分析和KEGG功能富集分析,绘制蛋白质相互作用网络,筛选血根碱调控T24细胞的靶基因.采用GSEA_4.2.3进行靶基因集富集分析,以确定靶基因富集的相关通路.基于GEPIA网站和"survival"R软件包评估靶基因高表达组和低表达组的无进展间隔期、疾病特异性生存期、总生存期差异.将血根碱和靶基因蛋白结构进行分子对接,并计算结合能.采用实时荧光定量PCR法检测实验组和对照组细胞中的靶基因.结果 实验组T24细胞增殖能力和穿膜细胞数低于对照组(P均<0.05).血根碱对T24细胞的IC50为0.200 3 μmol/L、对SV-HUC-1细胞的IC50为0.709 9 μmol/L.筛选出血根碱调控T24细胞的靶基因为基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、前列腺素—内过氧化物合酶2(PTGS2).MMP-2、MMP-9、PTGS2与调节上皮细胞增殖的通路有关.MMP-9高表达者疾病特异性生存期和总生存期低于低表达者(P均<0.05).血根碱与MMP-2、MMP-9、PTGS2结合能分别为-8.8、-8.6、-10.0 kcal/mol.实验组PTGS2、MMP-2、MMP-9 mRNA表达低于对照组(P均<0.05).结论 血根碱可在不影响SV-HUC-1细胞的浓度下抑制膀胱癌T24细胞的增殖迁移能力.血根碱对膀胱癌细胞增殖迁移能力的调控作用可能与调控MMP-2、MMP-9、PTGS2表达并影响上皮细胞增殖相关通路有关.
关键词：血根碱膀胱癌细胞增殖细胞迁移基质金属蛋白酶2基质金属蛋白酶9前列腺素—内过氧化物合酶2
分类号：R737.14(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(82004110)中国博士后科学基金面上项目(2022M722674)徐州市医学后备人才项目(XWRCHT20220009)
论文发表日期：2024-07-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
英文信息